PCV-2 ORF2和PRRSV ORF5基因的扩增与双基因真核表达载体的构建

文献类型： 中文期刊

第一作者： 赵鸿雁

作者： 赵鸿雁;李俊;丛晓燕;曹帅;王文志;张秀美;王金宝

作者机构：

关键词： 猪圆环病毒2型;ORF2;猪繁殖与呼吸综合征病毒;ORF5;真核表达载体

期刊名称： 动物医学进展

ISSN： 1007-5038

年卷期： 2006 年 27 卷 11 期

页码： 65-68

摘要： 根据GenBank中猪圆环病毒2型ORF2基因序列和猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5基因序列,分别设计一对引物,应用PCR和RT-PCR扩增出PCV-2 ORF2基因和PRRSV ORF5基因。将PCR产物ORF2经NheⅠ/EcoRⅠ双酶切回收后插入真核表达载体pIRES得到pIRES-ORF2,RT-PCR产物ORF5经NotⅠ/XbaⅠ双酶切回收后插入pIRES-ORF2构建重组质粒pIRES-ORF2/ORF5。对此质粒中的插入片段,进行PCR RT-PCR及双酶切鉴定,同时对插入序列进行测序分析,表明SD1株ORF2与国内多种毒株的同源性为99%,pIRES-ORF2ORF5转移载体ORF5基因的核苷酸推导氨基酸与北美洲原型(VR-2332株)氨基酸同源性为99%。此重组表达载体的成功构建,为进一步研究PCV-2 ORF2及PRRSV ORF5编码蛋白的生物学活性及研究猪圆环病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒二联核酸疫苗奠定了基础。

分类号： S852.65`Q78

  • 相关文献

[1]猪圆环病毒2型武威株ORF2基因序列分析及真核表达载体的构建. 马友记,柳纪省,赵兴绪. 2005

[2]猪圆环病毒2型Cap蛋白原核表达载体的构建、表达及蛋白纯化. 刘玉伟,辛长勋,孙盼盼,王硕,高梅,时建立,彭喆,吴晓燕,王永明,李俊. 2019

[3]2种猪圆环病毒2型TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立及比较（英文）. 周忠涛,王小敏,汪伟,茅爱华,温立斌,倪艳秀,何孔旺. 2015

[4]猪圆环病毒2型SYBRGreen Real-time qPCR检测方法的建立. 冯华,刘运超,陈玉梅,魏蔷,张改平. 2018

[5]2008～2011年中国部分地区猪圆环病毒2型的分子流行病学调查. 李玲,李国新,周艳君,童武,王礞礞,童光志. 2012

[6]猪圆环病毒2型快速直接PCR检测方法的建立与流行病学调查. 徐引弟,闫静娟,焦文强,王治方,张青娴,朱文豪,李海利,王克领. 2018

[7]猪圆环病毒2型ORF2基因的优化表达及活性检测. 路明华,王宏俊,路迎迎,张培君,龚玉梅. 2014

[8]猪圆环病毒2型ORF2基因在PcDNA3.1中的表达效果. 车勇良,石运通,庄向生,陈少莺,王隆柏,魏宏,陈如敬,吴学敏,周伦江. 2011

[9]河南省及周边地区猪圆环病毒2型分子流行病学调查. 焦文强,王治方,王克领,白献晓,郎利敏,李海利,朱文豪,张青娴,徐引弟. 2017

[10]猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5基因的克隆、表达与免疫印迹. 刘焕,冉多良,王一成,袁秀芳,徐丽华. 2008

[11]2014-2017年山东省部分规模化猪场PRRSV ORF5基因的遗传演化分析. 曲向阳,孙英军,张洪亮,周磊,刘媛媛,任夫波,赖清华,夏天,周明明,杨汉春. 2018

[12]华东部分地区猪繁殖与呼吸综合征病毒分子流行病学调查. 范玉凤,邹敏,张玉玉,杨旭兵,宋健兰,吴发兴,吴家强. 2018

[13]猪繁殖与呼吸综合征病毒CH-1R株致弱过程中ORF5基因遗传变异分析. 吴国军,蔡雪辉,刘永刚,王洪峰,王淑杰,石文达,马平,张琪,李成君. 2007

[14]PRRSV流行株Nsp2、ORF5和ORF3基因序列的分析. 王旭荣,张彩勤,赵炳武,张春红,杨增岐,宋长绪. 2008

[15]华北地区猪繁殖与呼吸综合征病毒变异分析. 焦文强,白献晓,徐引弟,王克领,郎利敏,朱文豪,李海利,张青娴,张立宪,游一,王治方,许峰. 2017

[16]2014年～2016年某大型规模化猪场猪繁殖与呼吸综合征病毒的遗传演化分析. 李真,张洪亮,张晶,张文立,刘春晓,相丽润,冷超粮,彭金美,王倩,安同庆,童光志,蔡雪辉,田志军. 2017

[17]猪繁殖与呼吸综合征病毒分离株GP5基因的遗传变异与系统进化分析. 梁望旺,杨克礼,伍锐,熊忠良,刘泽文,段正赢,徐涤平. 2009

[18]猪繁殖与呼吸综合征病毒广东株ORF5基因在大肠杆菌中的表达. 陈建君,宋长绪,杨增岐,王贵平. 2005

[19]2020-2023年甘肃猪繁殖与呼吸综合征病毒的基因遗传变异分析. 焦守德,张婧,李平花,王健,韩庆彦,张雨星,魏达礼,王方洲,白兴文,卢曾军,马雪青,孙普. 2024

[20]猪圆环病毒2型Rep基因真核表达载体的构建和免疫原性分析. 王静,刘成倩,李红,易建中,于宗幸,陈磊,孙晓云. 2016

作者其他论文 更多>>

微信小程序