FMDV 3C蛋白酶基因的克隆及在昆虫细胞中的表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 曹轶梅

作者： 曹轶梅;卢曾军;孙普;孙甲川;刘在新

作者机构：

关键词： FMDV;3C蛋白酶基因;Sf9细胞;杆状病毒;表达

期刊名称： 微生物学报

ISSN： 0001-6209

年卷期： 2008 年 48 卷 3 期

页码： 312-316

收录情况： CSCD

摘要： 口蹄疫病毒3C蛋白酶在病毒的致病机理、聚蛋白前体的加工和RNA的复制上起着很重要的作用，是当前抗病毒研究的一个重要靶点。本研究从AsiaⅠ型FMDV适应细胞毒中提取RNA，用RT-PCR技术扩增3c基因，首先克隆到pGEM-T载体，再亚克隆到杆状病毒转移载体pMelBacB中，构建出重组转移载体pMel-3C。最后将含有目的基因的转移载体与线性化的杆状病毒DNA共转染Sf9细胞，通过噬斑筛选和PCR鉴定，获得了重组杆状病毒。重组病毒经扩增后以10个MOI感染Sf9细胞，接种病毒72h后收获细胞，样品经SDS-PAGE和Western blot证实3C蛋白获得表达，分子量约23kDa，与预测蛋白大小一致，且能被FMDV感染阳性血清所识别。本研究为空衣壳的体外组装及新型抗病毒药物设计的研究奠定了基础。

分类号：

  • 相关文献

[1]FMDV3C蛋白酶基因的克隆及在昆虫细胞中的表达. 曹轶梅,卢曾军,孙普,孙甲川,刘在新. 2008

[2]Asia Ⅰ型FMDV全衣壳蛋白基因在昆虫细胞中的表达与免疫活性分析. 曹轶梅,孙甲川,卢曾军,孙普,郭建宏,刘在新. 2009

[3]AsiaⅠ型FMDV全衣壳蛋白基因在昆虫细胞中的表达与免疫活性分析. 曹轶梅,孙甲川,卢曾军,孙普,郭建宏,刘在新. 2009

[4]抗菌肽B基因的点突变及在昆虫细胞中的表达. 吴代飞,曾宪松,张银东,彭存智,黄亚东,郑学勤. 1999

[5]禽网状内皮组织增生病病毒gp90基因在杆状病毒中的表达及其产物的活性分析. 高立,祁小乐,高玉龙,高宏雷,秦立廷,邓小芸,王笑梅. 2009

[6]口蹄疫病毒非结构蛋白3ABC基因重组杆状病毒的构建与表达. 马江涛,卢曾军,曹轶梅,郭慧琛,郭建宏,祝秀梅,刘在新,杨孝朴. 2007

[7]猪流行性腹泻病毒S1基因在昆虫细胞中的表达与鉴定. 杨德强,李慧春,陈鹏飞,王康,李先斌,张文超,虞凌雪,姜一峰,高飞,黄勤峰,于海,童光志,周艳君. 2017

[8]禽呼肠孤病毒σC基因在杆状病毒表达系统中的表达及其活性鉴定. 孙美玉,秦立廷,高玉龙,祁小乐,高宏雷,王永强,王笑梅. 2011

[9]A型口蹄疫病毒多抗原表位杆状病毒表达载体的构建及表达. 李登科,刘新生,方玉珍,潘丽,吕建亮,张中旺,周鹏,蒋守田,张永光,王永录. 2014

[10]β_2肾上腺素受体基因在Sf9细胞中的表达及纯化. 王健,刘媛,张俊花,韩正政,兰凤英. 2017

[11]β2肾上腺素受体基因在sf9细胞中的表达及纯化. 王健,刘媛,张俊花,韩正政,兰凤英. 2016

[12]口蹄疫病毒结构蛋白VP1与细胞间黏附分子ICAM-2重组融合蛋白的表达及免疫原性分析. 芦延珍,刘新生,周鹏,方玉珍,张永光,刘霞,王永录,杜晓华. 2017

[13]口蹄疫病毒VP31基因在昆虫细胞中的表达. 孙甲川,曹轶梅,卢曾军,刘在新,魏彦明. 2009

[14]H5N1亚型禽流感病毒HA基因在昆虫细胞中的表达及其生物活性鉴定. 张晓霁,刘明,刘春国,杨涛,张云. 2007

[15]柔嫩艾美耳球虫表面抗原Sag10基因的克隆及在昆虫杆状病毒表达系统中的表达. 岳明,丁宏标,JoopvandenHeuvel,V.Jger,乔宇,陈志敏. 2008

[16]尼帕病毒和亨得拉病毒核蛋白基因在杆状病毒表达系统的表达及反应原性鉴定. 肖昌,徐兴然,查云峰,张玉静,宣华,涂长春. 2006

[17]半胱氨酸蛋白酶基因在家蚕杆状病毒表达系统中的表达. 林旭瑷,李卫国,陈寅,易咏竹,张志芳,何家禄. 2003

[18]家蚕NPV SOD基因序列和在大肠杆菌中表达. 王文兵,季平,吴峻,何家禄,吴祥甫. 1999

[19]A型口蹄疫病毒结构蛋白VP1在杆状病毒系统中的表达及鉴定. 陈鹏飞,刘新生,周鹏,方玉珍,潘丽,张中旺,吕建亮,王永录,张永光. 2016

[20]流感病毒血凝素基因在昆虫细胞中的表达. 刘明,于康震,张云,孔宪刚,徐宜为. 2000

作者其他论文 更多>>

微信小程序