香蕉束顶病毒nsp酵母双杂交诱饵质粒的构建及自激活验证

文献类型: 中文期刊

第一作者: 王祥

作者: 王祥;张秀春;余乃通;梁洁;周朋;刘志昕

作者机构:

关键词: 香蕉束顶病毒;nsp基因;酵母双杂交;诱饵载体;自激活

期刊名称: 植物研究

ISSN: 1673-5102

年卷期: 2015 年 35 卷 05 期

页码: 741-745+790

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 香蕉束顶病毒(Banana bunchy top virus,BBTV)DNA6编码的核穿梭蛋白(nuclear shuttle protein,NSP)在病毒的侵染、复制、运输中起重要作用。为了利用酵母双杂交系统研究BBTV DNA6与寄主香蕉蛋白的互作,本实验利用两对引物的PCR扩增得到BBTV nsp片段,混合各自PCR产物进行熔化退火可得到1/4两端含有EcoRⅠ和Bam HⅠ的酶切位点序列的DNA产物,将目的片段连接到酵母双杂交系统的p GBKT7诱饵载体中,成功获得p GBKT7-nsp,并将重组质粒p GBKT7-nsp转化入Y2H Gold酵母菌株中进行毒性检测和自激活验证。结果表明,p GBKT7-nsp没有自激活活性,同时对酵母细胞也无毒性,符合酵母双杂交诱饵质粒的要求,可用于下一步的蛋白互作实验。

分类号: S436.68

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