利用TAIL-PCR和RT-PCR技术克隆云芝植酸酶基因

文献类型： 中文期刊

第一作者： 杨帆

作者： 杨帆;林俊芳;苗灵凤;郭丽琼

作者机构：

关键词： 云芝;植酸酶;TAIL-PCR;RT-PCR

期刊名称： 应用与环境生物学报

ISSN： 1006-687X

年卷期： 2006 年 12 卷 05 期

页码： 618-622

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 从采绒革盖菌(Coriolus versicolor,常被称为杂色云芝)中筛选到产植酸酶基因.根据植酸酶基因的保守序列设计引物P1、P2,从云芝中分离克隆植酸酶基因的片段.再在分离到的已知序列的5′端和3′端设计嵌套的特异引物SP1、SP2、SP3和SP1′、SP2′、SP3′,利用TAIL-PCR技术进行分离已知序列的侧翼序列.结合Blastn、ORF和Primer5.0软件,在侧翼序列上设计特异引物P3、P4,最终从云芝中分离克隆到全长的植酸酶基因B4.再在B4序列的基础上设计引物phyP rt1、phyP rt2,利用这两个引物通过RT-PCR技术从云芝中克隆到全长的植酸酶基因B5.通过分析,分离克隆到的植酸酶基因可能是新的基因.图4参12

分类号： S567.3

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