鲤疱疹病毒2型和3型双重TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立与应用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 陈永聪

作者： 陈永聪;方勤美;柯翎;施少华

作者机构：

关键词： 鲤疱疹病毒2型;鲤疱疹病毒3型;双重TaqMan qPCR

期刊名称： 海洋渔业

ISSN： 1004-2490

年卷期： 2025 年 47 卷 005 期

页码： 619-628

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为快速、高效鉴别鲤疱疹病毒2型（cyprinid herpesvirus 2,CyHV-2）和3型（cyprinid herpesvirus 3,CyHV-3）,针对鲤疱疹病毒基因组的保守序列，设计了2对特异性引物，通过优化反应条件，建立了检测CyHV-2和CyHV-3的双重TaqMan qPCR方法，并对该方法特异性、灵敏度和重复性进行了评价。同时利用该方法对实验室保存的金鱼（Carassius auratus var.）和锦鲤（Cryprinus carpiod haematopterus）临床样品进行检测。结果显示，该方法能特异性检测CyHV-2和CyHV-3,而对水产养殖中其他常见DNA或RNA病毒无交叉反应；敏感性实验显示，该方法的最低检测量为10 copies·μL-1,表明该方法具有较高的灵敏度；测定结果在组内和组间重复变异系数均小于3%,重复性良好。使用该方法对实验室保存的37份金鱼和78份锦鲤临床样品进行检测，病毒检出结果与用国家标准（GB/T 36194-2018）和行业标准（SC/T 7212.1-2011）方法检测的结果一致。对5份CyHV-2（金鱼样品）和5份CyHV-3（锦鲤样品）阳性的临床样品进行混合后检测，结果均为CyHV-2和CyHV-3双阳性。研究表明，本研究建立的双重TaqMan qPCR检测方法具有特异性强、灵敏度高和重复性好等优点，可以为临床上CyHV-2和CyHV-3的快速定量检测和鉴别诊断提供新的工具和方法。

分类号： S941.41

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