PRRSV兰州分离株ORF3和ORF5基因的克隆与序列分析及其杆状病毒表达载体的构建

文献类型： 中文期刊

第一作者： 赵娜

作者： 赵娜;田宏;吴锦艳;祁燕蓉;满自萍;尚佑军;何生虎;刘湘涛

作者机构：

关键词： 猪生殖与呼吸综合征病毒;ORF3基因;ORF5基因;克隆;杆状病毒表达载体

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2009 年 39 卷 03 期

页码： 189-195

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 根据GenBank中猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)中国代表株CH-1a的基因组序列,设计包含完整ORF3、ORF5基因序列的2对特异引物,利用RT-PCR技术扩增PRRSV兰州分离株(Lanzhou株)的ORF3和ORF5基因,并对其进行序列测定,同时与已发表的13株PRRSV进行同源性比较。将扩增的PRRSV Lanzhou株ORF3、ORF5基因分别克隆到杆状病毒表达载体pFastBacHTA上,将经酶切及测序鉴定的阳性重组质粒pFastBacHTA-ORF3、pFastBacHTA-ORF5分别转化到DH10Bac感受态细胞。结果显示,ORF3、ORF5基因长度分别为765 bp、603 bp,发现核苷酸的同源性分别为88.0%~99.2%、87.3%~99.0%,获得了重组转座子rBacmid-ORF3r、Bacmid-ORF5。

分类号： S852.659.6

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