针对NSP4基因的shRNA抑制牛轮状病毒的体外增殖

文献类型： 中文期刊

第一作者： 陈方园

作者： 陈方园;王洪梅;杨少华;武建明;高运东;刘晓;杨宏军;王长法;仲跻峰;王立群;何洪彬

作者机构：

关键词： BRV;shRNA;NSP4基因

期刊名称： 病毒学报

ISSN： 1000-8721

年卷期： 2010 年 26 卷 03 期

页码： 86-90

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 本研究根据牛轮状病毒(Bovine rotavirus,BRV)的NSP4基因序列,设计并构建了shRNA重组慢病毒载体RNAi-H1-89,利用脂质体介导法,将RNAi-H1-89与辅助质粒共转染293细胞,包装shRNA重组慢病毒;重组慢病毒感染MA104细胞24h后继续接种BRV,以针对LacZ基因的shRNA重组慢病毒为对照,48h后与LacZshR-NA对照比较,RNAi-H1-89明显抑制MA104细胞病变;RT-PCR检测结果表明,针对NSP4基因的shRNA可特异性抑制牛轮状病毒NSP4基因表达;病毒滴度测定表明,在转染50%、75%、95%RNAi-H1-89质粒的细胞培养上清液中,病毒滴度分别是对照组的50%、20%和10%。上述实验结果表明,针对NSP4基因的shRNA能高效地沉默NSP4基因,并且能阻断牛轮状病毒增殖。

分类号： S852.659.4

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