猪德尔塔冠状病毒重组N蛋白表达及单克隆抗体制备

文献类型： 中文期刊

第一作者： 康欣桐

作者： 康欣桐;隋泽;赵梓桥;乌日尼乐;张昆丽;范瑞文;张建峰

作者机构：

关键词： 猪德尔塔冠状病毒;N蛋白;原核表达;单克隆抗体

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2025 年 55 卷 009 期

页码： 1166-1173

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了制备猪德尔塔冠状病毒（PDCoV）N蛋白和抗N蛋白的单克隆抗体（m Ab），将PDCoV N基因克隆至p GEX-6p-1载体中，转化至BL21(DE3)感受态细胞，诱导纯化后获得可溶性重组N蛋白，约43k Da，大小符合预期。用重组N蛋白对小鼠进行免疫，采用细胞融合技术制备单克隆抗体，共获得5株（2D8、2E2、6A1、9C10、5H10）稳定分泌N蛋白抗体的杂交瘤细胞株。通过免疫印迹和间接免疫荧光试验（IFA）判定5株杂交瘤细胞株均能够特异性地识别N蛋白，其中2株（2D8、6A1）腹水抗体效价均高达1∶1 024 000。中和试验表明，2株单克隆抗体均具有病毒中和作用。结果表明，成功表达了N蛋白及制备了5株能稳定分泌与PDCoVN蛋白特异性结合的单克隆抗体，为PDCoVN蛋白的功能和PDCoV检测方法的研究提供了基础，对该疾病的临床诊断、流行病学调查与疫病防控具有重要意义。

分类号： S852.651

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