犬结核SYBR Green荧光定量PCR检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 王伟

作者： 王伟;陈鸿军;刘佩红;王水明;周锦萍;于圣青;丁铲

作者机构：

关键词： 结核分技杆菌;IS1081;SYBRGreen;荧光定量PCR

期刊名称： 中国动物传染病学报

ISSN： 1674-6422

年卷期： 2009 年 17 卷 02 期

页码： 55-59

摘要： 本研究基于IS1081基因建立了鉴定犬结核的SYBR Green荧光定量PCR方法。在最佳反应条件下反应效率为1.09,获得的标准曲线相关系数R值达0.999 5,标准曲线的线性范围达到1~1×107拷贝8个数量级,最低可检测到约10个目的拷贝,即31.4fg DNA。根据溶解曲线分析,扩增产物中无引物二聚体的影响,说明所设计引物特异,退火温度合适。这表明本研究建立的SYBR Green荧光定量方法灵敏度高、定量范围广。利用该方法对临床样品进行检测,结果发现:与结核杆菌分离培养方法比较,符合率为85(。240份犬猫鼻拭子中150份被检测为阳性,这说明犬猫鼻腔中分枝杆菌携带率很高。

分类号： S858.292

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