油菜薹中醚菊酯酶联免疫(ELISA)快速检测方法建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 王恒玲

作者： 王恒玲;李敏;李培武;张奇;张文

作者机构：

关键词： 醚菊酯;多克隆抗体;酶联免疫吸附法;油菜薹(蔬菜)

期刊名称： 中国油料作物学报

ISSN： 1007-9084

年卷期： 2015 年 03 期

页码： 354-359

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为快速有效监控蔬菜(油菜薹)醚菊酯农药残留,采用醚菊酯与牛血清白蛋白偶联物(ethofenproxBSA)抗原免疫新西兰大白兔获得抗醚菊酯多克隆抗体。以醚菊酯与卵清白蛋白偶联物(ethofenprox-OVA)为检测抗原,利用此抗体,进行间接竞争ELISA法试验。通过棋盘格实验确定了最佳抗原包被反应质量浓度为0.25μg/m L,最佳抗原包被条件为37℃孵育2h;一抗最佳稀释度为1∶32 000;最佳p H值与离子浓度分别为6.0和0.16mol/L;最佳封闭试剂与有机溶剂分别为脱脂奶粉和10%甲醇/PBS。在此优化条件下,建立了醚菊酯竞争抑制曲线,抗体的灵敏度(IC50)为0.28μg/m L,检测线性范围(IC20~IC80)为0.079 8~3.578μg/m L。采用该方法对市场抽样进行加标回收测定,平均回收率在75.26%~97.56%之间,实际样品检测间接ELISA与GC/MS检测结果相关性系数达到0.994,灵敏度、精密度和准确度均符合快速检测要求。该法为快速、简便、低耗的醚菊酯免疫检测方法提供了可能。

分类号： TS255.7

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