葡萄目标起始密码子多态性反应体系的优化

文献类型： 中文期刊

第一作者： 张君玉

作者： 张君玉;郭大龙;龚莹;刘崇怀;李猛

作者机构：

关键词： 葡萄;SCoT;正交设计;单因素试验;体系优化

期刊名称： 果树学报

ISSN： 1009-9980

年卷期： 2011 年 28 卷 02 期

页码： 209-214

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： SCoT标记是一种新型目的基因分子标记方法,采用L16(45)正交试验和单因素试验2种方法优化了葡萄SCoT-PCR反应体系,结果表明正交试验中关键影响因子为dNTPs浓度,单因素试验中为dNTPs和Mg2+浓度。综合2种方法,优化的葡萄SCoT-PCR反应体系为:Mg2+2.0 mmol.L-1、dNTPs 0.3 mmol.L-1、Taq酶1.0 U、引物0.3μmol.L-1、DNA模板30 ng,总体积20μL。扩增程序为:94℃预变性5 min;94℃变性1 min,54℃退火1 min,72℃复性2 min,34个循环;最后72℃延伸8 min。该反应体系在20个葡萄品种的验证中表现出良好的稳定性和可重复性,该反应体系的建立为葡萄种质遗传多样性评价、基因组分析、指纹图谱构建、分子标记辅助选择育种等研究提供了新的技术手段。

分类号： S663.1

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