质粒介导的美人鱼发光杆菌美人鱼亚种理化特性与毒力差异

文献类型： 中文期刊

第一作者： 李京泽

作者： 李京泽;于永翔;刘定远;王春元;王印庚;杨新月;张正

作者机构：

关键词： 美人鱼发光杆菌美人鱼亚种;毒力质粒;质粒消除;胞外酶活性;致病性

期刊名称： 微生物学通报

ISSN： 0253-2654

年卷期： 2024 年 008 期

页码： 2831-2843

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【背景】美人鱼发光杆菌美人鱼亚种(Photobacterium damselae subsp. damselae, PDD)是一种可导致多种海洋生物患病的病原菌，比较基因组测序分析表明，具有高致病性的PDD菌株内携带大质粒pPDD1608，基因注释分析表明该质粒携带多种毒力基因和分泌系统相关基因，而对于其功能机制缺乏报道。【目的】以一株高致病性PDD为研究对象，通过诱导缺失突变获得质粒缺失菌株，比较分析野生菌株与质粒缺失株的表型与致病性相关特征差异，明确该质粒对PDD理化表型和致病力的影响。【方法】建立变温-SDS质粒去除方法，构建菌株PDD1608的质粒缺失株ΔpPDD1608；利用TSB固体培养基及扫描电镜观察分析菌株PDD1608与ΔpPDD1608的表观形态特征；通过细菌微量生化鉴定管测定菌株PDD1608与ΔpPDD1608的生理生化表型；利用K-B纸片扩散法测定菌株PDD1608与ΔpPDD1608的药物敏感性；使用指示培养基测定菌株PDD1608与ΔpPDD1608的体外磷脂酶活性和溶血性；通过注射感染许氏平鲉测定菌株PDD1608与ΔpPDD1608的致病力。【结果】变温-SDS法可有效去除菌株PDD1608的大质粒，并基于全基因组序列信息建立了特异位点PCR质粒去除效果检测方法；理化检测结果表明，质粒缺失株与野生株的药物敏感性与生理生化特性并无差异，但质粒缺失株的溶血性与磷脂酶活性显著降低；注射感染试验表明，野生株对许氏平鲉表现为高致病性，实验鱼在24h内全部死亡，而质粒缺失株对许氏平鲉致病性较低，24h死亡率仅为56.6%。【结论】通过对野生株与质粒缺失株溶血能力、磷脂酶活性及对许氏平鲉致病力的研究证实，毒力质粒pPDD1608是介导菌株PDD1608具有高致病力的重要元件。为后续深入分析该毒力质粒及染色质介导的PDD致病和毒力蛋白分泌机制提供了技术支撑与理论基础。

分类号： S941.42

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