建鲤内参基因EF-1α的实时荧光定量PCR方法的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 唐永凯

作者： 唐永凯;俞菊华;徐跑;李建林;李红霞;董在杰;夏正龙

作者机构：

关键词： 建鲤;内参基因;EF-1α;实时荧光定量PCR

期刊名称： 江西农业大学学报

ISSN： 1000-2286

年卷期： 2012 年 34 卷 03 期

页码： 166-170

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 真核生物延伸因子基因(EF-1α)在蛋白质翻译过程中起着重要的作用,其序列具有高度的保守性,常作为内参基因应用于real time PCR中。通过RT-PCR克隆出建鲤(Cyprinus carpio var.jian)EF-1α的部分cDNA序列,其长度为425 bp,翻译成140个氨基酸,Blast结果显示与其它鱼类leptin的相似性为98%。同时也克隆出建鲤EF-1α相应的DNA序列,共506 bp。cDNA和DNA的序列比对显示克隆出的建鲤EF-1α含有1个相位为0的内含子,在此基础上设计一对跨越内含子的引物,采用SYBR GreenⅠ染料建立了real time PCR方法。以肝脏cDNA为标准品,建立了标准曲线,并进行了融解曲线分析。结果表明,所建立的方法具有特异性强、相关系数高、线性范围广等优点,可应用于建鲤的功能基因表达研究。

分类号： S917.4

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