抗鸭坦布苏病毒E蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 白小飞

作者： 白小飞;刘红玉;陈玉环;殷秀辰;刘明;张云

作者机构：

关键词： 鸭坦布苏病毒;E蛋白;原核表达;单克隆抗体;免疫印迹;斑点杂交;间接免疫荧光

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2014 年 08 期

页码： 833-837

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了制备抗鸭坦布苏病毒(DTMUV)囊膜(E)蛋白的单克隆抗体,将鸭坦布苏病毒E基因进行原核表达,目的蛋白被纯化后免疫6周龄雌性BALB/c小鼠,按常规的单克隆抗体的制备技术,取其脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合,经间接ELISA方法筛选及3次连续克隆化共获得6株能稳定分泌抗E蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞,它们分别被命名为1F3、1G2、1B11、2A5、3B6和4F9。Dot-ELISA及Western-blot分析结果表明,这6株单克隆抗体均能与原核表达的E蛋白特异性结合。经间接免疫荧光(IFA)试验验证,这6株单克隆抗体均能识别鸭坦布苏病毒感染的细胞,且荧光主要位于细胞质中。结果表明,本研究成功制备了6株抗鸭坦布苏病毒E蛋白的单克隆抗体。鸭坦布苏病毒E蛋白单克隆抗体的制备为今后鸭坦布苏病毒快速的病原学诊断以及E蛋白的结构和功能研究奠定了物质基础。

分类号： S852.65

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