绵羊SP-A基因实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立及应用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 谢秀兰

作者： 谢秀兰;黎帅;刘溪源;杨慧君;李颖康

作者机构：

关键词： 荧光定量RT-PCR;绵羊;肺表面活性蛋白A;mRNA

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2016 年 06 期

页码： 781-785

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 肺表面活性蛋白A(surfactant protein A,SP-A)具有维持肺内稳态、防御病原感染以及协助免疫应答等重要作用。本试验建立了定量检测绵羊SP-A基因及内参基因B2M(beta 2 microglobulin)m RNA表达水平的SYBR Green I实时荧光定量RT-PCR方法,并采用该方法对健康滩羊、小尾寒羊和滩寒杂交羊三个绵羊品种肺脏中SP-A m RNA的表达情况进行了检测。结果显示,SP-A基因和B2M基因的扩增效率分别为94.1%和95.9%;线性范围分别在1×10-1~1×10-6和1×10-1~1×10-7;相关系数分别为0.998和0.999;熔解曲线分别在84.5℃和83.0℃出现一个特异峰;滩羊SP-A m RNA的表达水平略高于小尾寒羊和滩寒杂交羊。本试验建立的绵羊SP-A基因实时荧光定量RT-PCR方法特异性好、检测线性范围广,为绵羊SP-A m RNA表达水平的检测提供了重要方法。

分类号： S826

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