番鸭小鹅瘟病毒和番鸭细小病毒三引物双重PCR鉴别检测方法的建立与评价

文献类型： 中文期刊

第一作者： 王劭

作者： 王劭;刘鸿威;程晓霞;朱小丽;江丹丹;肖世峰;陈少莺;陈仕龙

作者机构：

关键词： 番鸭小鹅瘟病毒(MDGPV);番鸭细小病毒(MDPV);双重PCR

期刊名称： 农业生物技术学报

ISSN： 1674-7968

年卷期： 2025 年 33 卷 005 期

页码： 1172-1180

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 番鸭小鹅瘟病毒(Muscovy duck-origin goose parvovirus, MDGPV)是经典鹅细小病毒(Classical Goose parvovirus, cGPV)和番鸭细小病毒(Muscovy duck parvovirus, MDPV)基因重组产生的新型水禽细小病毒，是引起雏番鸭(Cairina moschata)严重下痢和渗出性肠炎的主要病原之一，导致雏番鸭免疫力下降，患病率和死亡率升高。本研究旨在建立一种能够同时鉴别检测MDGPV和MDPV的三引物双重PCR方法，并对2种病毒当前的流行情况进行鉴别与监测。根据GenBank中已发布的MDGPV和MDPV衣壳蛋白1 (viral capsid protein 1, VP1)基因的重组特征，应用Oligo 7.0软件设计并合成了3条鉴别引物，两两组合形成2套PCR反应体系进行扩增，目的片段大小分别为493 bp (MDGPV)和827 bp (MDPV)，分别构建MDGPV和MDPV阳性重组质粒作为标准品，进行双重PCR扩增。结果表明，本研究成功建立了一种可以同时检测MDGPV和MDPV的双重PCR鉴别方法。该三引物双重PCR方法可重复性好，特异性与敏感性高，对MDGPV和MDPV的最低检出测限分别为99.6和96.1 copies/μL总DNA。对102份疑似水禽细小病毒感染发病的临床样品进行检测，MDGPV阳性检出率为31.37%(32/102),MDPV阳性检出率为7.84%(8/102)，混合感染阳性检出率为1.96%(2/102)，与GPV、MDPV通用SYBR GreenⅠPCR检测方法及病毒分离鉴定结果一致。综上所述，本研究所建立的MDGPV和MDPV双重PCR诊断方法特异性高，敏感性好，丰富了水禽细小病毒病的检测手段，有助于MDGPV和MDPV的临床诊断及流行病学监测。

分类号： S858.32

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