犬细小病毒荧光定量PCR检测方法的建立与评价

文献类型: 中文期刊

第一作者: 李英俊

作者: 李英俊;史利军;李刚;侯绍华;曾妮;章金刚;朱鸿飞

作者机构:

关键词: 犬细小病毒;VP2蛋白基因;实时荧光定量PCR

期刊名称: 中国兽医学报

ISSN: 1005-4545

年卷期: 2010 年 30 卷 12 期

页码: 1594-1597

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 通过序列比对和Blast分析,选定犬细小病毒(Canine parvovirus,CPV)VP2蛋白保守区基因为检测的目的基因,引物采用Primer Premier 5.0软件设计。利用灵敏度较高的TaqMan探针法建立CPV核酸检测方法。通过对标准品的扩增、测序及对标准扩增曲线的绘制,建立CPV核酸检测方法。同时对建立的检测方法进行了检测特异性、灵敏度和重复性分析。将阳性对照标准品进行10倍梯度稀释后可检测到102拷贝/μL样品,表明该检测体系具有较高的检测灵敏度。通过分析表明,本检测方法在用空白对照及类似的猪细小病毒、猪圆环病毒作为扩增对照时,没有发现非特异性产物的产生,表明该体系对于CPV的检测是特异的。通过6次批间重复检测,体系的变异系数小于3%,表明该检测体系具有良好的重复性。

分类号: S858.292

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