文献类型： 中文期刊
第一作者： 张欣
作者： 张欣;韩先干;王亚磊;张海洋;王权;祁克宗;蒋蔚;宋祥军
作者机构：
关键词： 副溶血弧菌;外膜蛋白A;免疫原性;免疫保护性
期刊名称： 中国预防兽医学报
ISSN：
年卷期： 2020 年 011 期
页码：
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 外膜蛋白A(OmpA)为副溶血弧菌主要表面蛋白之一,具有较强的免疫原性,在疫苗上有很好的应用前景.为评价副溶血弧菌OmpA的免疫效果,本研究通过PCR方法获得副溶血弧菌SH112株的ompA(VP0764)基因的全长片段,测序结果显示该蛋白编码区全长990 bp.对其编码蛋白质进行生物信息学分析,结果显示该蛋白是含有信号肽的稳定蛋白,无跨膜结构,有11个抗原决定簇,具有较高免疫原性.扩增去除信号肽序列的成熟蛋白基因903 bp,并构建重组表达载体pET28a-ompA进行原核表达,结果显示,获得分子量约为39 ku的重组蛋白HisOmpA(VP0764).采用该蛋白免疫ICR小鼠(0.1 mg/只)3次后收集血清制备鼠多克隆抗血清,利用ELISA检测抗血清效价,结果显示制备的鼠多克隆抗血清效价达132 000以上.利用western blot检测制备的鼠多克隆抗血清,结果显示该血清可与表达蛋白和全菌蛋白发生特异性反应,表明所表达的目的蛋白具有良好免疫原性,能识别天然OmpA蛋白.将45只8周龄ICR小鼠随机分成3组,分别免疫灭活的SH112全菌疫苗(1*108cfu/只)、His-OmpA(VP0764)重组蛋白(0.1 mg/只)及PBS(200μL/只),每两周免疫一次,三免后10 d采用副溶血弧菌SH112株(2*107cfu/只)攻毒,结果显示免疫SH112全菌和His-OmpA(VP0764)重组蛋白的实验组小鼠免疫保护率分别是73%和40%,与对照组差异显著.本研究为副溶血弧菌OmpA的功能与疫苗开发研究奠定了基础.
分类号： S852.61
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