血清4型禽腺病毒六邻体蛋白的原核表达及鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 刘娜

作者： 刘娜;刘青涛;李银;杨婧;李祥瑞

作者机构：

关键词： 血清4型禽腺病毒;六邻体蛋白;原核表达

期刊名称： 华北农学报

ISSN： 1000-7091

年卷期： 2018 年 05 期

页码： 106-110

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 通过原核表达的方法得到血清4型禽腺病毒的主要结构蛋白六邻体蛋白;根据GenBank中血清4型禽腺病毒六邻体蛋白的基因序列,设计一对特异性引物,利用普通PCR方法扩增得到hexon基因的全长序列。将PCR扩增得到的血清4型禽腺病毒六邻体基因片段,在其两端插入酶切位点后克隆至载体pMD18T中,经PCR鉴定和测序分析正确后,与原核表达载体pET-32 a进行连接,构建pET-32 a-hexon原核表达载体,并对其进行双酶切和测序鉴定。将构建成功的表达载体转化至BL21(DE3)中,用1 mmol/L的IPTG进行诱导表达,对得到的重组蛋白进行SDS-PAGE分析和Western Blot鉴定;经双酶切鉴定和测序鉴定,pET-32a-hexon原核表达载体构建成功,插入的六邻体蛋白基因片段大小为2 814 bp,在1 mmol/L浓度IPTG诱导3 h时重组蛋白表达量最高,且重组蛋白主要以包涵体形式存在于沉淀中。SDS-PAGE分析结果显示,融合蛋白分子量为118 ku。免疫印迹分析结果显示,融合蛋白可被抗FAdV-4的血清和HIS标签抗体特异性识别;成功表达了血清4型禽腺病毒的主要结构蛋白六邻体蛋白,且得到的重组蛋白具有良好的反应原性,可用于血清4型禽腺病毒的进一步研究中,为血清4型禽腺病毒病的预防和治疗奠定了良好的基础。

分类号： S852.65

  • 相关文献

[1]基于血清4型禽腺病毒Fiber-2间接ELISA方法的建立. 梅楠,孙海伟,李允章,汪凯,王桂军,陈鸿军. 2019

[2]高致病性血清4型禽腺病毒hexon基因在昆虫细胞中的表达及鉴定. 梅梅,陆吉虎,张雪花,唐应华,侯继波. 2018

[3]牛腺病毒3型六邻体蛋白的截短表达、单克隆抗体制备及初步应用. 严昊,朱远茂,史鸿飞,王雪枝,蔡红,王姝,马磊,薛飞. 2014

[4]鸡血清4型禽腺病毒与HH9亚型禽流感病毒亚型禽流感病毒、新城疫病毒混合感染的鉴定. 梅梅,陆吉虎,张雪花,唐应华,侯继波. 2017

[5]血清4型禽腺病毒fiber-2基因在昆虫细胞中的表达及其免疫原性分析. 梅梅,陆吉虎,张雪花,唐应华,卢宇,侯继波. 2019

[6]鸭源血清4型禽腺病毒的分离鉴定. 卢凤英,孙华伟,张敬峰,刘传敏,范鑫,张晓曦,张小飞. 2018

[7]小麦TaPDK基因的序列分析、原核表达及纯化. 杨书玲,张龙雨,张改生,桑青,刘红占,朱启迪,张新钵,赵新亮. 2013

[8]桑树多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白基因MaPGIP1的克隆及功能分析. 王晓红,朱攀攀,梁燕梅,韩淑梅,赵爱春,王传宏,鲁成,余茂德. 2015

[9]中国对虾Rab7全长cDNA的克隆及原核表达. 卢金凤,梁高峰,梁艳,黄倢. 2012

[10]水稻瘤矮病毒S9基因的生物信息学分析及原核表达蛋白的抗血清制备. 赵芹,邓永枢,阮小蕾,李华平. 2010

[11]猪流行性腹泻病毒N蛋白的原核表达及生物学活性鉴定. 陈如敬,吴学敏,车勇良,王隆柏,魏宏,庄向生,刘玉涛,严山,周伦江. 2013

[12]凡纳滨对虾造血激素基因全长序列分析及其克隆与表达. 梁高峰,梁艳,成君军,张士璀,黄倢. 2012

[13]烟曲霉β-葡萄糖苷酶的基因克隆、表达及酶学性质分析. 欧阳浩淼,黄日波,陈东,金城. 2013

[14]黑曲霉果胶裂解酶基因的克隆与原核表达. 谢茂芳,薛保国,吴坤. 2013

[15]甘蔗花叶病毒CI蛋白在玉米韧皮部细胞中的免疫定位. 秦艳红,刘冬梅,周涛,范在丰. 2009

[16]甘蔗花叶病毒VPg蛋白的原核表达及其在玉米中的免疫定位. 秦艳红,刘冬梅,周涛,范在丰. 2009

[17]鸡传染性法氏囊病病毒VP3蛋白的原核表达及其B细胞抗原表位鉴定. 赵坤,郑玉妹,赵德明,赵朴,赵恒章,常新耀,王选年. 2009

[18]鸡新城疫病毒Lasota株HN蛋白主要抗原表位基因在大肠杆菌中的表达. 赵坤,王选年,赵德明. 2008

[19]新城疫病毒xx08株HN蛋白主要抗原区的原核表达及其在抗体检测中的应用. 阮涛,孙国鹏,王丽,李鹏,朱艳平,王选年. 2015

[20]龙眼成花逆转花芽α-tubulin基因的克隆与原核表达. 黄榕辉,王喜军,黄春梅,梁文裕,陈伟. 2011

作者其他论文 更多>>

微信小程序