鸡细胞周期检验点激酶2(cChk2)单克隆抗体制备和鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 高俊娜

作者： 高俊娜;连雪;孙海伟;李泽君;张训海;JUNG Yong-Sam;陈鸿军;钱莺娟

作者机构：

关键词： 鸡细胞周期检验点激酶2(cChk2);原核表达;单克隆抗体

期刊名称： 细胞与分子免疫学杂志

ISSN： 1007-8738

年卷期： 2016 年 32 卷 09 期

页码： 1255-1259

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 目的制备特异性鸡细胞周期检验点激酶2(cChk2)单克隆抗体(m Ab)。方法反转录PCR扩增cChk2基因,将其克隆入原核表达质粒p GEX-4T-3中,在BL21(DE3)中经异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,经SDS-PAGE检测可溶性。用cChk2腹腔免疫BALB/c小鼠,利用间接免疫荧光法(IFA)和Western blot法检测抗血清;血清检测阳性后,取小鼠脾脏与小鼠骨髓瘤细胞Sp2/0融合,利用IFA和有限稀释法筛选阳性单克隆杂交瘤细胞株。结果 cChk2主要以包涵体形式存在,多抗血清具有良好的效价,获得9株阳性杂交瘤细胞株,即1F4、2D9、2G1、3D9、3E3、4B5、4E2、5C9及5F7。结论成功制备了特异性良好的cChk2 m Ab。

分类号： S852.4

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