荷花ISSR引物筛选及反应体系优化

文献类型： 中文期刊

第一作者： 徐君

作者： 徐君;李静会;李欣;姜红卫

作者机构：

关键词： 荷花;ISSR引物筛选;体系优化

期刊名称： 江苏农业科学

ISSN： 1002-1302

年卷期： 2014 年 42 卷 10 期

页码： 42-44

收录情况： 北大核心

摘要： 利用加拿大哥伦比亚大学(UBC)公布的100条ISSR引物,以2个荷花品种的DNA为模板进行PCR扩增。采用单因素试验方法对荷花ISSR-PCR反应体系的5个因素(Mg2+、引物、dNTP、模板DNA、Taq酶)进行浓度优化,确定了荷花ISSR反应的25μL最佳扩增体系为:10×Taq Buffer 2.5μL,Mg2+3.0 mmol/L,dNTP 0.2 mmol/L,引物1.0μmol/L,Taq酶1.00 U,模板DNA 40 ng。筛选出8条扩增条带较好的ISSR引物,并对其引物进行梯度PCR试验,筛选出各引物对应的最佳退火温度,扩增共计获得61条ISSR条带。

分类号： S682.32

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