猪传染性胸膜肺炎放线杆菌外膜蛋白基因的克隆和表达

文献类型: 中文期刊

第一作者: 邵美丽

作者: 邵美丽;刘思国;王春来;郭设平;宫强;佟恒敏

作者机构:

关键词: 猪胸膜肺炎放线杆菌;外膜蛋白基因;克隆;表达

期刊名称: 中国兽医科学

ISSN: 1673-4696

年卷期: 2006 年 36 卷 01 期

页码: 25-28

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 以猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(APP)血清7型25-4株基因组DNA为模板,用PCR扩增外膜蛋白(OMP)基因特异片段,并克隆于pMD 18-T中,经酶切及核苷酸序列分析鉴定后,亚克隆于原核表达载体pGEX-6P-1,成功构建了重组表达载体pGEX-omp;以此转化大肠埃希氏菌BL21(DE3),经SDS-PAGE鉴定,表达的可溶性融合蛋白分子质量约为61 ku,命名为GST-OMP。以GST亲和层析柱纯化并利用Xa因子酶解,获得切掉标签的OMP。经ELISA检测,该OMP蛋白能够与兔抗APP的阳性血清反应,具有很好的免疫活性。GST-OMP蛋白的成功表达为APPOMP相关分子生物学功能的研制奠定了基础。

分类号: S852.619

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