副猪嗜血杆菌细胞致死膨胀毒素CdtB蛋白的表达及其免疫保护效力分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 李大鹏

作者： 李大鹏;徐胜奎;刘双红;李刚;王春来

作者机构：

关键词： 副猪嗜血杆菌;CdtB;原核表达;免疫保护

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2016 年 38 卷 03 期

页码： 245-249

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为评价副猪嗜血杆菌(H.parasuis)细胞致死膨胀毒素CdtB蛋白对BALB/c小鼠的免疫保护效力,本研究以H.parasuis血清5型参考菌株Nagasaki基因组为模板,通过PCR扩增cdtB基因,将cdtB基因去除信号肽编码序列后克隆于pET-22b(+)载体中,构建重组质粒pET-cdtB,并在E.coli BL21(DE3)感受态中诱导表达。结果显示,重组CdtB蛋白(rCdtB)以可溶形式表达。以纯化后的100μg蛋白免疫6周龄BALB/c小鼠,2周后进行一次加强免疫并进行血清抗体检测,其抗体效价高于1:25 600,表明该蛋白具有良好的免疫原性。淋巴细胞增殖试验结果表明rCdtB能够显著刺激小鼠T淋巴细胞增殖。此外,分别以5 LD_(50)的H.parasuis血清5型HN10菌株和血清13型ZD12菌株攻毒,结果表明rCdtB可以对血清5型HN10菌株提供60%以上的免疫保护力,而对血清13型ZD12菌株可以提供50%以上的免疫保护力,这表明rCdtB可以作为重组亚单位疫苗的候选抗原蛋白。

分类号： S852.61

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