H5N1禽流感病毒微磁粒捕捉系统和SYBRGreenⅠ荧光定量RT-PCR诊断方法的建立

文献类型: 中文期刊

第一作者: 张坤

作者: 张坤;李刚;贾凤芹

作者机构:

关键词: H5N1禽流感病毒;微磁粒捕捉系统;荧光定量RT-PCR

期刊名称: 中国畜牧兽医学会禽病学分会第十四次学术研讨会论文集

ISSN:

年卷期: 2008 年

页码: 1

收录情况: CSCD

摘要: 根据GenBank中禽流感病毒H5N1型的保守区设计了一对引物和荧光染料,经优化了反应条件与反应体系,利用荧光定量PCR原理,结合LightCycler检测系统,同时利用微磁珠包被禽流感N1抗体,通过微磁粒捕捉系统对病毒进行浓缩,得到N1亚型的病毒,首次建立了微磁粒捕捉系统与实时定量结合检测禽流感病毒H5N1型的方法。结果,本研究成功建立了磁微粒捕捉系统利用磁性微球与抗体的共价结合,得到含有N1抗体的免疫磁珠,所用包埋式单分散二氧化硅磁性微球具有良好的单分散性和磁响应性,抗体偶联率达到53%,用甘氨酸淬灭作用显著,通过重复试验表明可以达到试验要求。进一步利用抗原抗体特异性结合从而吸附含有N1抗...

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