犊牛盲肠微生物总DNA的提取方法

文献类型： 中文期刊

第一作者： 于萍

作者： 于萍;王加启;卜登攀;邓露芳;刘开朗;魏宏阳;周凌云

作者机构： 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所动物营养学国家重点实验室

关键词： 犊牛盲肠微生物;细菌总DNA;PCR扩增;超声波细胞破碎;反复珠磨法

期刊名称： 乳业科学与技术

ISSN： 1671-5187

年卷期： 2009 年 32 卷 01 期

页码： 14-16

摘要： 采用反复冻融法、玻璃珠法和超声波+反复珠磨的方法提取犊牛盲肠的微生物总DNA,并对以上三种方法进行比较,从中确定最佳的方法,以实现普通实验条件下成功提取符合PCR扩增要求的DNA。经紫外分光光度分析表明,超声波+反复珠磨的方法所得的DNA的A_(260)/A_(280)的比值为1.81,0.8%琼脂糖凝胶电泳结果显示,所提DNA片段分子量大于20 kb,适于酶解和PCR扩增要求。以提取的DNA样品为模板,利用细菌通用引物,对其16S rDNA进行PCR扩增,获得了1.7 kb大小特异性很好的预期条带。这是研究犊牛盲肠微生物的关键一步。

分类号： S852.6

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