SYBR Green I实时定量PCR方法检测2型猪圆环病毒

文献类型： 中文期刊

第一作者： 潘群兴

作者： 潘群兴;何孔旺;黄克和

作者机构：

关键词： 2型猪圆环病毒;实时荧光定量PCR;标准曲线

期刊名称： 扬州大学学报(农业与生命科学版)

ISSN： 1671-4652

年卷期： 2007 年 28 卷 03 期

页码： 13-17

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 利用PCR技术扩增出2型猪圆环病毒(PCV)ORF2保守区基因107 bp片段,并克隆到pMD-19-T载体上,纯化的质粒作为PCR检测的标准模板,以10倍梯度稀释质粒为标准模板,进行荧光定量PCR,并绘制标准曲线。再以提取的PCV-2、PCV-1、猪细小病毒(PPV)和猪伪狂犬病毒(PRV)的DNA作为模板,采用同样体系进行实时PCR检测。结果表明:建立的实时定量PCR方法,起始模板浓度与样本阈值循环数(Ct)值之间呈很好的线性关系,标准曲线斜率为-0.32,相关系数r2为0.997,Ct值为11.9~26.9。PCV-2能扩出S型荧光曲线,熔解曲线的峰狭窄单一,而PCV-1、PPV和PRV均不能扩出。对32份健康猪和32份断奶仔猪多系统消耗综合征(PMWS)可疑猪样品定量检测:健康猪阳性率为44%(14/32),病毒载量均小于104拷贝.μL-1;PMWS可疑猪阳性率96.8%(31/32),病毒载量均大于105拷贝.μL-1。实时荧光定量PCR方法可用于2型猪圆环病毒定性及定量的检测。

分类号： S854.43

  • 相关文献

[1]SYBR Green Ⅰ实时定量PCR方法检测2型猪圆环病毒. 潘群兴,何孔旺,黄克和. 2007

[2]利用不同实时定量PCR方法分析相对基因表达差异. 余舜武,刘鸿艳,罗利军. 2007

[3]瘤胃总甲烷菌实时荧光定量PCR方法的构建. 李长青,金海,栗原光规. 2009

[4]瘤胃脂肪分解菌实时荧光定量PCR方法的构建. 范文斌,刘永斌,李长青. 2015

[5]瘤胃总甲烷菌实时荧光定量PCR方法的构建. 李长青,金海,栗原光规. 2010

[6]实时荧光定量PCR法检测抗虫棉Bt基因拷贝数方法的建立. 闫喜中,张锐,孟志刚,孙国清,周涛,郭三堆. 2008

[7]滇南中蜂蜂王卵黄原蛋白基因实时荧光定量PCR的建立. 陈顺安,宋文菲,王艳辉,罗卫庭. 2014

[8]猪IGF-Ⅰ基因荧光定量PCR标准曲线的建立. 肖书奇,张嘉保,张树敏,赵志辉,刘保国,李爽,戴立胜,赵中利,高妍,李毅. 2006

[9]香菇135菌丝生物量及其DNA含量标准曲线的构建. 余昌霞,曹晖,陈明杰,汪虹. 2010

[10]猪2型圆环病毒SYBR Green荧光定量PCR检测方法的建立. 郭慧娟,李秀丽,张国伟,鄢明华,王利丽,张莉,孙英峰. 2014

[11]巴彦淖尔市耕地土壤中可溶性盐分测定方法探讨. 武悦,王鹏,李彦标,赵春慧,莫日陶格斯,施建林. 2018

[12]金针菇菌丝生物量与其DNA含量标准曲线的构建. 余昌霞,曹晖,陈明杰,汪虹. 2013

[13]应用SYBRGREENI实时荧光定量PCR检测猪呼吸与繁殖综合征病毒的研究. 王晓武,符芳,许红喜,陈微静,周艳君,李曦. 2007

[14]SYBRGreenⅠ荧光RT—PCR检测新城疫病毒的研究. 司昌德,秦红刚,孟庆文,闫丽辉,刘加森,韩凌霞,姜骞,曲连东. 2008

[15]荧光定量PCR检测牛性别相关基因DAX1表达的标准质粒和标准曲线的构建. 徐超,杜卫华,王宗礼,余大为,王栋,郝海生,赵学明,朱化彬. 2010

[16]miR-275在长角血蜱不同发育阶段及组织中表达的动态变化. 王芳芳,罗金,袁小松,谢俊仁,田占成,王素艳,郭锦霞,刘光远. 2014

[17]real-timeRT-PCR检测禽流感病毒的初步探讨. 刘丽玲,王秀荣,陈化兰. 2005

[18]显色剂加入方式及结果计算方法对土壤磷酸酶测定结果的影响. 贝美容,罗雪华,杨红竹. 2015

[19]串联质谱法检测洋葱中36种例行监测农药及其基质效应的探讨. 易盛国,韩梅,邱世婷. 2012

[20]裸大麦PKABA1基因实时荧光定量PCR方法的建立. 吴昆仑,邓晓青,姚晓华. 2012

作者其他论文 更多>>

微信小程序