猪瘟兔化弱毒疫苗RT-LAMP检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 张兴娟

作者： 张兴娟;韩秋影;孙元;李宏宇;常天明

作者机构：

关键词： 猪瘟兔化弱毒疫苗;猪瘟病毒;反转录-环介导等温扩增;检测

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2010 年 07 期

页码： 701-707

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 根据GenBank中登录的猪瘟病毒(CSFV)野毒株、猪瘟兔化弱毒疫苗(HCLV)和牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的NS5B基因序列,利用在线软件Pri mer Explorer V4Software,设计了一套环介导逆转录等温核酸扩增(RT-LAMP)引物,建立了特异性检测HCLV的RT-LAMP方法。在BstDNA聚合酶作用下,65℃恒温反应1h即可完成扩增过程,扩增产物可通过20g/L琼脂糖凝胶电泳或加入SYBR GreenⅠ染料进行分析。经检测,该方法对于CSFV、BVDV以及其他猪源病毒无特异性扩增,具有良好的HCLV特异性;其灵敏度与本实验室建立的TaqMan实时荧光定量RT-PCR检测结果一致,均达到5个拷贝。分别用这两种方法对58份市售猪瘟弱毒疫苗进行检测,结果符合率达100%。表明,建立的HCLV RT-LAMP技术可以应用于基层实验室或养殖场,便于养殖户对疫苗中的弱毒含量进行监测。

分类号： S858.28

  • 相关文献

[1]猪瘟兔化弱毒疫苗——半个世纪的回顾. 仇华吉,童光志,沈荣显. 2005

[2]猪瘟病毒野毒株和兔化弱毒疫苗株复合实时荧光定量RT-PCR鉴别方法的建立. 赵建军,成丹,李娜,孙元,史子学,涂长春,童光志,仇华吉. 2007

[3]猪瘟兔化弱毒疫苗株TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法的建立及初步应用. 刘大伟,张小飞,胡来根,李郁,尹秀凤,毛火云. 2010

[4]猪瘟病毒阳性血清的猪瘟抗体检测与分析. 孙华伟,张敬峰,赵永前,茅爱华. 2015

[5]RT-PCR和免疫荧光抗体试验检测猪瘟病毒的比较研究. 俞伏松,车勇良,江斌,吴胜会,林琳,陈少莺,林天龙. 2007

[6]复合RT-PCR检测猪繁殖与呼吸综合征和猪瘟及猪流感等3种病毒方法的建立. 夏俊,石进纯,成进,张美玲,陆桂丽,汪萍. 2013

[7]猪瘟病毒检测技术研究进展. 杨克礼,徐涤平,梁望旺,刘泽文,汪宏才,段正赢. 2007

[8]犬瘟热病毒野毒株与疫苗株鉴别检测RT-LAMP方法的建立. 杨天阔,刘大飞,姜骞,张洪英,曲连东. 2012

[9]牛副流感病毒3型RT-LAMP检测方法的建立及应用. 师新川,温永俊,王凤雪,胡嘉欣,杨博超,王炜,宋妮,程世鹏,武华. 2012

[10]蟾酥注射液对猪瘟兔化弱毒疫苗免疫效果影响的试验观察. 谢丽丽,胡庭俊,曾芸,彭晓峰,苏子杰,杨善忠,黄宏业,何家康. 2014

[11]荧光定量PCR作为猪瘟兔化弱毒疫苗效价检验替代方法的研究与应用. 陈锴,姚华伟,王长江,徐璐,范学政,赵启祖,邹兴启,朱元源,赵燕. 2013

[12]猪瘟疫苗免疫失败钓原因及防制措施. 张玉杨,严平,郭成留,郭红霞,任玉兰. 2007

[13]荧光定量RT-PCR方法与兔体定型热试验对于检测猪瘟兔化弱毒疫苗的平行关系. 葛叶,张兴娟,朱庆虎,韩秋影,王牟平,李伟杰,孙建宏,仇华吉. 2011

[14]法氏囊活性肽对仔猪猪瘟抗体水平及其生长性能的影响. 黄小国,李卫东,侯小亮,张勇,张金富,蒋春之,周斌,许家荣,陈溥言,缪德年. 2008

[15]猪场制订免疫程序应考虑的问题. 成建国. 2008

[16]猪瘟病毒研究进展与防控中的几项实用技术. 胡峰,崔玉东,崔尚金. 2010

[17]应用定量RT-PCR对猪瘟兔化弱毒疫苗的质量评价研究. 韩文,王楠,张兴娟,葛叶,韩秋颖,孙元,李素,仇华吉. 2012

[18]表达非洲猪瘟病毒p54蛋白的重组猪瘟兔化弱毒疫苗的构建及其免疫原性评价. 李树稳,杨晓柯,管翔雨,张广柱,黄淑坚,李永锋,仇华吉. 2024

[19]猪瘟病毒E2蛋白B细胞识别基序的筛选. 王爱萍,马丽平,李姣,邓瑞广,邢广绪,郝慧芳. 2008

[20]猪瘟病毒E2基因的克隆表达. 朱文豪,张以芳,徐引弟,王治方,张玉杨,郭成留. 2009

作者其他论文 更多>>

微信小程序