口蹄疫病毒双效疫苗载体的构建及其体外表达研究

文献类型： 中文期刊

第一作者： 杨彬

作者： 杨彬;兰喜;殷相平;李学瑞;李宝玉;方玉萍;柳纪省

作者机构：

关键词： 口蹄疫病毒;反义RNA;pIRES;双效疫苗载体

期刊名称： 首届中国兽药大会——兽医生物制品学、兽医微生物学学术论坛论文集（2008）

ISSN：

年卷期： 2008 年

页码： 7

收录情况： CSCD

摘要： 用RT-PCR法获得了针对口蹄疫病毒(FMDV)基因组5'非编码区内包含病毒复制起始元件的基因片段ASCN及其结构蛋白VP1基因,将其分别克隆至双顺反子表达载体pIRES中,构建成了双表达质粒pASCN-IR-VP1,经酶切、PCR及DNA测序分析表明ASCN及VP1基因已正确地插入到pIRES中,编码序列及插入方向均正确。用脂质体介导法将双效表达质粒导入BHK-21细胞后,经RT-PCR、实时荧光定量PCR检测表明双效表达质粒中的ASCN在细胞中得到了有效转录,mRNA的表达量达到了1.27×10~6个拷贝/μL;经夹心ELISA及间接免疫荧光标记等试验表明VP1结构蛋白基因在BHK-21细...

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