大丽轮枝菌致病缺陷型T-DNA插入突变体的筛选与鉴定

文献类型: 中文期刊

第一作者: 崔伟业

作者: 崔伟业;周雷;单柳颖;张君;戴小枫;郭维

作者机构:

关键词: 大丽轮枝菌;致病力;T-DNA;hiTAIL-PCR;侧翼序列分析

期刊名称: 棉花学报

ISSN: 1002-7807

年卷期: 2018 年 01 期

页码: 29-37

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 【目的】从大丽轮枝菌T-DNA突变体库中筛选鉴定致病缺陷型突变体并分析致病相关基因。【方法】将落叶型大丽轮枝菌菌株Vd991的294个T-DNA插入突变体在寄主棉花上进行致病力测定。利用Southern杂交和hiTAIL-PCR(High-efficiency thermal asymmetric interlaced PCR)技术分别对筛选获得的9个致病力显著降低的突变体进行拷贝数和侧翼序列分析。【结果】与接种野生型Vd991的棉花相比,接种突变体的棉花的病情指数极显著降低。Southern杂交表明其中1个突变体中T-DNA为双拷贝插入,其余8个突变体均为单拷贝插入。生物学特性分析发现T-DNA的插入导致这些突变体在生长速率和产孢量等方面与野生型Vd991相比均有不同程度的降低。Blast比对分析明确了这些突变体中T-DNA的插入位置和在基因组上的分布,并从野生型菌株Vd991中成功克隆得到了这些可能影响大丽轮枝菌致病力的相关基因。【结论】筛选和鉴定T-DNA插入突变是在全基因组范围内快速获得致病相关基因信息的1种有效方法,极大的促进了大丽轮枝菌的致病分子机制等研究,为进一步培育抗病棉花品种奠定了基础。

分类号: S435.62

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