猪脑心肌炎病毒SYBRGreenⅠreal-timePCR检测方法的建立

文献类型: 中文期刊

第一作者: 施开创

作者: 施开创;陈进喜;屈素洁;许瑞胜;熊毅;刘棋;陈汉忠;李刚

作者机构:

关键词: 猪;脑心肌炎病毒;荧光定量PCR;检测方法

期刊名称: 第四届中国畜牧科技论坛论文集

ISSN:

年卷期: 2009 年

页码: 5

收录情况: CSCD

摘要: 针对猪脑心肌炎病毒(Encephalomyocarditisvirus,EMCV)VP1基因序列设计并合成一对引物,构建含有该引物扩增序列的重组质粒作为阳性标准品,建立了检测EMCV核酸的SYBRGreenIreal-timePCR方法。该方法线性关系好,标准曲线的相关系数达到0.991;敏感性高,初始模板的检出下限为1×10~1拷贝/μL,比常规PCR方法高100倍;特异性强,与其他猪源病毒如FMDV、PRRSV、CSFV、PRV均不发生交叉反应;重复性好,组内与组间的变异系数均小于3%。应用所建立的方法检测17份临床可疑病例的心、脑组织样品,样品1份为阳性。结果表明,本研究建立的...

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