日本脑炎病毒基因Ⅰ型与Ⅲ型复合RT-PCR鉴别方法的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 张亮

作者： 张亮;刘澣扬;石双艳;袁磊;伍锐

作者机构：

关键词： 日本脑炎病毒;复合RT-PCR;基因Ⅰ型;基因Ⅲ型;鉴别

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2014 年 04 期

页码： 419-424

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为建立一种简单快捷的鉴别日本脑炎病毒(JEV)基因Ⅰ型与基因Ⅲ型的方法,根据基因Ⅰ型和基因Ⅲ型JEV的保守序列,分别设计合成了针对基因Ⅰ型和Ⅲ型JEV的RT-PCR引物P1、P3和P2、P3,以JEV SA14-14-2和CZ1株的核酸提取液为模板,通过对反应体系及条件的优化,建立了一种可快速鉴别JEV基因Ⅰ型与Ⅲ型的复合RT-PCR方法,并用建立的方法对27份临床样品进行了检测。结果显示,以设计合成的引物进行复合RT-PCR扩增,得到与基因Ⅰ型JEV预期相符的381bp的特异性条带,得到与基因Ⅲ型JEV预期相符的550bp的特异性条带,而对猪瘟病毒、猪细小病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒及猪伪狂犬病病毒核酸的扩增结果均为阴性。敏感性试验结果显示,该方法对基因Ⅰ型和基因Ⅲ型JEV的最小检出量分别为1.0pg/μL和10pg/μL。利用建立的复合RT-PCR方法对27份临床样品进行检测,结果5份为基因Ⅰ型,2份为Ⅲ型,与核苷酸序列分析结果一致。结果表明,建立的复合RT-PCR方法具有特异性强、敏感性高、快速简便等特点,可用于检测及鉴别基因Ⅰ型与基因Ⅲ型JEV。

分类号： S852.659.6

  • 相关文献

[1]一步法复合RT-PCR鉴别ND强毒与AI病毒的研究. 黄兵,马秀丽,宋敏训,王莉莉,李峰,陈溥言. 2005

[2]鸭甲肝病毒与新型呼肠孤病毒复合RT-PCR检测方法的建立. 孙晓军,王晓艺,韩宏宇,迟海华,杨宏禹,于可响. 2015

[3]复合RT-PCR检测猪繁殖与呼吸综合征和猪瘟及猪流感等3种病毒方法的建立. 夏俊,石进纯,成进,张美玲,陆桂丽,汪萍. 2013

[4]马铃薯X、Y病毒的复合RT-PCR检测体系的建立. 孙琦,张春庆,孟昭东,张发军,穆春华,李文才,张庆伟. 2009

[5]简化RACE方法测定基因Ⅲ、Ⅵb和Ⅶd型新城疫病毒leader和trailer序列及分析. 仇旭升,丁铲,陈鸿军,刘秀梵. 2010

[6]新城疫病毒溶瘤株SH15全基因组序列的测定及分析. 段坦然,孟春春,车路平,廖瑛,仇旭升,谭磊,孙英杰,宋翠萍,丁铲,唐兆新. 2017

[7]一株野鸭源基因Ⅲ型新城疫病毒主要生物学特性及基因组序列测定分析. 石跃,刘怀然,刘培欣,李东伟,杨煦,华育平,孔宪刚. 2011

[8]一株野鸭源基因III型新城疫病毒主要生物学特性及基因组序列测定分析. 石跃,刘怀然,刘培欣,李东伟,杨煦,华育平,孔宪刚. 2011

[9]猪流行性乙型脑炎病毒种猪精液分离株的鉴定及进化分析. 王兴涛,罗俊,滕蔓,樊剑鸣,鄂巍,禹斌,刘力,张改平. 2011

[10]一株基因Ⅲ型禽呼肠孤病毒变异株的分离及其灭活疫苗免疫原性初步评价. 刘芮,李晓涵,高金慧,刘长军,祁小乐,李凯,张艳萍,崔红玉,王素艳,高玉龙,高立. 2024

[11]基因Ⅰ型草鱼呼肠孤病毒VP7蛋白合成肽抗体的制备及应用. 刘世旭,王庆,常藕琴,周文礼,曾伟伟,王英英. 2018

[12]基因Ⅰ型草鱼呼肠孤病毒TaqMan Real-Time PCR检测方法的建立及应用. 殷亮,王庆,曾伟伟,李永刚,王英英,刘春,梁红茹,石存斌,吴淑勤. 2014

[13]猪源乙型脑炎病毒的分离鉴定及其E基因分析. 郑浩,张建武,袁世山. 2009

[14]鸡呼肠孤病毒基因Ⅰ型变异株的分离鉴定和致病性分析. 许明清,汪建华,马芹,刘丹丹,张中波,赵杰,石艳红,唐代萍,王胜,郭明,胡峰,于可响,李玉峰. 2024

[15]中国猪繁殖与呼吸综合征病毒流行历史及现状. 郭振华,陈鑫鑫,李睿,乔松林,郭军庆,张改平. 2018

[16]猪源乙型脑炎病毒的分离鉴定及E基因分析. 郑浩,张建武,袁世山. 2009

[17]一株洞庭湖候鸟新城疫病毒的分离鉴定及基因组特征分析. 李小阳,吉艳红,刘彬,朱启运,李郁. 2015

[18]日本脑炎病毒NSl基因在大肠杆菌中的高效表达. 金吉东,仇华吉,田志军,周艳君,张守发,童光志. 2003

[19]基因Ⅰ/Ⅴ型日本脑炎嵌合病毒的构建及其生物学特性和致病性研究. 夏琦琦,张俊杰,杨扬,张妍,赵秋华,李宗杰,李蓓蓓,刘珂,邵东华,邱亚峰,魏建超,马志永. 2023

[20]猪源日本脑炎病毒NS3蛋白在小鼠脑组织中的表达特性. 邓绪芳,史子学,王晓杜,邱亚峰,沈阳,邵东华,马志永. 2010

作者其他论文 更多>>

微信小程序