大豆SCoT分子标记技术体系的优化、验证及检测

文献类型： 中文期刊

第一作者： 李强

作者： 李强;苏二虎;高聚林;孙继颖;于晓芳;谢岷

作者机构：

关键词： 大豆;SCoT;正交设计;单因素试验;体系验证;引物筛选

期刊名称： 中国油料作物学报

ISSN： 1007-9084

年卷期： 2013 年 35 卷 05 期

页码： 491-498

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 采用L25(56)正交试验和单因素试验2种方法对影响大豆SCoT-PCR反应的Mg2+浓度、dNTPs浓度、Taq DNA聚合酶用量、引物浓度和模板DNA用量等因素进行优化,优化后的20μL大豆SCoT-PCR体系为:Mg2+浓度2.0mmol·L-1、Taq聚合酶用量1.5U、引物浓度0.250μmol·L-1、dNTPs浓度0.2mmol·L-1、DNA模板用量30ng;退火温度最适为50.4℃。运用18个大豆品种验证,该反应体系稳定、可靠,并从82条引物中筛选出条带清晰、多态性较好的32条引物。利用大豆品种吉育75、本地黑豆及其10株F2对该反应体系进行了初步的遗传验证,结果显示,杂交后代植株中出现了双亲的位点和亲本位点的缺失。该反应体系的建立为大豆种质遗传多样性分析、遗传连锁图谱构建及分子标记辅助育种提供了新的技术手段。

分类号： S565.1

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