应用简并PCR方法检测转cry1A基因作物

文献类型： 中文期刊

第一作者： 李葱葱

作者： 李葱葱;闫伟;夏蔚;董立明;龙丽坤;李飞武

作者机构：

关键词： 转基因作物;抗虫性;cry1A基因;简并PCR;筛选检测方法

期刊名称： 食品科学

ISSN： 1002-6630

年卷期： 2018 年 14 期

页码： 317-322

收录情况： EI ; 北大核心 ; CSCD

摘要： 根据不同转基因作物中cry1A基因的保守区序列,建立简并聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)对转cry1A基因作物检测方法。cry1A基因(包括cry1Ab、cry1Ac、cry1Ab/Ac、cry1A.105、mcry1Ac)是抗虫转基因作物中使用频次最高的目的基因,常用作转基因成分筛选检测的靶标。应用Vector NTI Advance 11.5软件将已报道的20余种cry1A基因PCR检测方法中的引物与11个cry1A基因序列进行比对,结果显示,这些方法的引物序列不能同时与所有cry1A基因序列完全配对,每对引物的错配碱基数均大于3个,且许多错配发生在引物的3’端,表明这些cry1A基因检测方法理论上仅适用于部分特定的靶标基因。在对MON810、Bt11、Bt176等11种转基因作物中cry1A基因核苷酸序列进行比对分析基础上,以其5’端的保守核苷酸序列为模板,筛选到1对简并引物,建立了cry1A基因的简并PCR方法。应用该方法能特异性地检测11种转基因作物中的cry1A基因,检测灵敏度可稳定达到0.1%。该方法为转基因作物中cry1A基因的高效筛选检测提供了一种新的技术手段。

分类号： S188`TS201.6

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