猪细小病毒1型VP2蛋白的表达与单克隆抗体的制备及应用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 孙建慧

作者： 孙建慧;黄立平;危艳武;吴洪丽;王一平;张辉;刘丹;陈冬杰;张智慧;刘长明

作者机构：

关键词： 猪细小病毒1型;VP2蛋白;单克隆抗体

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2014 年 12 期

页码： 1279-1285

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为研制抗猪细小病毒1型(PPV1)VP2蛋白的单克隆抗体,用重组杆状病毒表达的PPV1VP2蛋白免疫BALB/c小鼠,融合后采用免疫过氧化物酶单层细胞染色试验筛选抗PPV1VP2的单克隆抗体阳性细胞株,并对单克隆抗体的腹水效价、免疫反应特性及亚类进行了系统鉴定。结果显示,共获得8株阳性杂交瘤细胞株,其腹水抗体效价均达1∶51 200,其中7株的重链亚类为IgG1,另1株(4A1)为IgM;6株的轻链为κ型,另2株(8D7和4A1)为λ型。这些单克隆抗体均可与PPV1感染的猪睾丸细胞呈阳性反应;Western-blot结果显示,这些单克隆抗体可与自然PPV1VP2蛋白产生良好的免疫反应。以其中1株单克隆抗体(8E4)建立了间接ELISA,通过对重组杆状病毒表达的PPV1VP2蛋白产物进行的动力学检测表明,第72小时蛋白表达量最高;对PPV1感染细胞增殖规律的测定结果显示,接种后第16小时可检测到病毒感染的阳性细胞,说明该病毒复制周期小于24h。本研究获得的单克隆抗体可用于重组VP2蛋白抗原的检测及病毒繁殖规律的研究。

分类号： S852.651

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