甜瓜遗传转化技术的优化及DRs类基因的应用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 万丽丽

作者： 万丽丽;王转茸;汤谧;张学军;任俭;曾红霞;张娜;孙玉宏;朱志坤

作者机构：

关键词： 甜瓜;农杆菌浸染;遗传转化;真空渗透;不定芽诱导;发育调控基因

期刊名称： 江苏农业科学

ISSN： 1002-1302

年卷期： 2023 年 007 期

页码： 49-58

收录情况： 北大核心

摘要： 甜瓜（Cucumis melo L.）是我国重要的设施栽培作物，具有重要的经济价值。随着农作物全基因组测序以及基因编辑技术的建立，遗传改良和基因功能验证亟需建立高效稳定的遗传转化体系。遗传转化率由基因型和植物激素互作所决定，目前，甜瓜遗传转化技术普遍存在遗传转化载体递送到细胞困难、芽再生难、遗传转化效率低等诸多问题。本研究选取5个厚皮甜瓜和4个薄皮甜瓜品种的子叶为外植体，对遗传转化试验中农杆菌浸染的方法、植物生长调节剂、筛选剂浓度等多个因素进行筛选，建立适合厚皮和薄皮甜瓜的遗传转化技术体系。结果表明，不定芽诱导最佳激素组合是1 mg/L 6-BA和1 mg/L ABA,最佳Basta筛选浓度为5 mg/L。由于甜瓜原形成层细胞位于维管组织的最深层，为提高农杆菌浸染效率，本研究采用纳米刷对子叶外植体表面均匀造伤，接着超声波和真空渗透压3个处理方式组合，其中在纳米刷造伤后进行超声波处理20 s,-1.0 kPa真空渗透压力下处理90 s后，绿色荧光蛋白（GFP）标记显示在甜瓜外植体的转化效率为82%～95%,在不定芽诱导培养基（SIM,1 mg/L 6-BA和1 mg/L ABA）能产生再生苗的外植体率为3%～10%。研究了GROWTH-REGULATING FACTOR5 （AtGRF5）、WUSHEL（AtWUS）、PLETHORA（AtPLT5）、WOUND INDUCED DEDIFFERENTIATION 1（AtWIND1）等发育调控因子（DRs）对甜瓜遗传转化再生的作用，选择4种甜瓜优良自交系种质转化含有DRs表达组件的遗传转化载体，之后在低浓度细胞分裂素的培养基上诱导不定芽再生，试验结果显示，超表达AtGRF5和AtPLT5能够提高转化率以及接种外植体的再生芽率。因此，开发并利用DRs能够有效改良甜瓜的遗传转化率，进而促进基因组编辑等生物技术在甜瓜育种中的应用。

分类号： S652

  • 相关文献

[1]硝酸银对根癌农杆菌介导的木薯遗传转化的影响. 郭运玲,尹奇,孔华,黄启星,左娇,贺立卡,郭安平. 2013

[2]甜瓜肌醇半乳糖苷合成酶基因CmGAS1的表达与功能分析. 张瑞腾,吕建春,周梦迪,刘静霖,李仁,郭仰东,王怀松,付秋实. 2018

[3]CmMLO2:一个与甜瓜白粉病感病相关的新基因. 程鸿,孔维萍,何启伟,王晓巍. 2013

[4]甜瓜组织培养及遗传转化研究进展. 侯丽霞,何启伟,卜丽霞,焦自高,董玉梅,王崇启. 2007

[5]甜瓜高效遗传转化体系的研究. 刘丽锋,张俊红,古勤生,李汉霞,叶志彪. 2011

[6]根癌农杆菌介导的甜瓜遗传转化. 方丽,任海英,茹水江,王汉荣. 2009

[7]乳酸钙-曲酸真空渗透处理对双孢蘑菇采后品质及微观结构的影响. 杨丰菊,谢新华,王赵改,杨慧,陈丽娟. 2015

[8]壳聚糖涂膜藕带的护色工艺研究. 李珊,朱毅,傅达奇,朱本忠,左进华,罗云波. 2013

[9]一种水稻真空渗透转化装置及方法的研究. 钟巧芳,李维蛟,殷富有,张敦宇,陈玲,陈越,曾民,程在全. 2019

[10]真空渗透钙离子和植物激素对灵武长枣贮藏保鲜效果的影响. 魏天军,窦云萍. 2008

[11]真空与乳酸钙处理对双孢蘑菇采后贮藏品质的影响. 陈丽娟,王赵改,杨慧,张乐,王晓敏,史冠莹. 2015

[12]无糖杨梅蜜饯的研制. 郑美瑜,邢建荣,程绍南,夏其乐,邵敏. 2007

[13]保鲜剂对灵武长枣保鲜效果和鲜食品质的影响. 魏天军,窦云萍. 2005

[14]黑果构杞组织培养技术研究. 樊光辉,马梦茹. 2021

[15]火龙果成年植株茎段直接诱导不定芽快繁体系建立. 邓仁菊,范建新,王永清,刘涛,金吉芬,彭志军. 2019

[16]不同制剂对茖葱种子发芽和直接分化不定芽诱导的影响. 张丽娟,曲继松,朱倩楠,李堃. 2018

[17]柱状苹果组培外植体褐化控制与不定芽诱导方法探索. 宋春晖,谢贝阳,董志丹,郑先波,李娟,宋尚伟,王苗苗,焦健,白团辉. 2020

[18]三种基因型羽衣甘蓝筛选适合叶绿体转化材料. 平璐,顾德峰,韦正乙,仲晓芳,林春晶,邢少辰,王云鹏. 2016

[19]杏胚珠培养及幼胚子叶不定芽诱导研究. 楚宗丽,王力荣,朱更瑞,冯义彬,方伟超. 2007

[20]不同草莓品种无菌苗增殖及不定芽诱导的研究. 张立磊,李桂荣,张浩,金万梅. 2018

作者其他论文 更多>>

微信小程序