适用于玉米种子分子检测的DNA快速提取新方法
文献类型: 中文期刊
第一作者: 朱万豪
作者: 朱万豪;葛建镕;刘志浩;梁紫越;任星旭;赵怡锟;王凤格;闫明明
作者机构:
关键词: 玉米种子;DNA提取;分子检测;蛋白酶K
期刊名称: 分子植物育种
ISSN: 1672-416X
年卷期: 2025 年 23 卷 016 期
页码: 5365-5371
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: DNA提取是应用DNA指纹鉴定技术进行分子检测的关键步骤,常见的DNA提取方法在DNA质量、提取速度、试剂危害程度、提取成本等方面皆有不足之处,因此,发展高效、经济、便捷的提取方法十分必要。本研究以玉米种子为材料,使用含蛋白酶K的SDS提取液,利用PCR仪进行提取程序,建立了一种DNA快速提取新方法。方法为使用的提取液含100μg/mL蛋白酶K,SDS含量推荐0.3%~0.7%,提取程序为55℃25 min、95℃10 min、4℃保存。由该方法提取的DNA琼脂糖凝胶电泳谱带清晰明亮,DNA链完整度较好,DNA质量较高;使用玉米纯度及真实性SSR引物进行PCR扩增,荧光毛细管电泳检测表明,引物扩增结果良好,荧光信号强,扩增峰型和片段大小与预期相符,背景干净无杂峰,DNA提取量及质量满足纯度及真实性检测的要求。该方法操作简单,96个样品的提取时间约为30 min,所提取的DNA可以很好地应用到后期的PCR反应中。该方法具备实际检测应用价值,尤其适用玉米种子的分子检测。
分类号: S513
- 相关文献
[1]玉米种子DNA快速提取及杂交种纯度的快速鉴定. 杨俊品. 2009
[2]大麻叶片基因组DNA快速提取方法与应用. 张庆滢,李磊,段慧婷,吕品,郭蓉,许艳萍,郭鸿彦,杨明. 2023
[3]发菜基因组DNA提取方法比较与分子鉴定研究. 陈雪燕,何兵强,谭晴晴,张全芳,汝医. 2018
[4]桑黄基因组DNA提取方法优化及分子鉴定. 陈力群,谭晴晴,陈雪燕,刘利平,刘国霞,胡悦,范阳阳,刘艳艳,步迅,张全芳. 2019
[5]2种蚜虫DNA提取方法的比较与改进研究. 韩玉翠,吕芃,侯升林,李素英,马雪,籍贵苏,杜瑞恒,刘国庆. 2014
[6]鸡蛋壳壳膜及表面角质层去除方法的优化与比较. 王佩伦,卢凤珠,张学余,王克华,李炳熠,刘长国. 2010
[7]九单48玉米高产栽培技术. 沈利国,赵华. 2007
[8]浅谈降低玉米种子加工破碎率的方法. 魏宏斌,张世全. 2013
[9]影响玉米种子发芽率的主要因素. 王亚莉,王兆川,马新春. 2016
[10]2O08年玉米种子市场评述. 佟屏亚. 2008
[11]等离子体技术处理玉米种子及效益分析. 柴寿江,方向前,付稀厚,李桂梅,李忠芹,郑军虎,郑在环,邢文志,吕端春,陈侠. 2007
[12]玉米种子萌发初期生理特性的变化研究. 马俊华,王自霞,刘建军,梦俊文,赵学梅,周晓梅. 2011
[13]玉米种子活力测定方法研究进展. 陈菁. 2015
[14]盐溶蛋白电泳和SSR标记鉴定苏玉20种子纯度的比较研究. 王波,彭宏,罗绪标,郭玲. 2016
[15]国内外玉米种子精选分级技术装备及发展趋势. 李寒松,陈立涛,张晓亮,孔凡祝,贾振超. 2016
[16]玉米种子老化过程中抗氧化酶活性的变化. 刘建军,马俊华,孟俊文,王自霞,周小梅. 2013
[17]老化玉米种子修复处理后的活力效应研究. 马俊华,刘建军,乔燕祥,王自霞,周晓梅. 2012
[18]套购玉米种子为何难以禁止——基于博弈论的诠释. 王军,梁晓玲,李季刚,戴泉,仲玉贵,孙国华. 2006
[19]我国种子加工机械发展现状及趋势. 曹兴乔. 2012
[20]基于高光谱成像技术与CARS算法的玉米种子含水率检测. 王超鹏,黄文倩,樊书祥,张保华,刘宸,王晓彬,陈立平. 2016
作者其他论文 更多>>
-
兼容双平台的玉米糯质基因InDel功能标记开发与应用
作者:朱维佳;王蕊;薛英杰;田红丽;范亚明;王璐;李松;徐丽;卢柏山;史亚兴;易红梅;陆大雷;杨扬;王凤格
关键词:糯玉米;糯质基因;功能标记;InDel;KASP;荧光毛细管电泳
-
中国和UPOV水稻品种DUS测试指南比较分析
作者:梁紫越;甘冰;梁琳;周传猛
关键词:水稻;DUS测试;测试指南
-
基于分子标记技术的玉米品种杂种优势模式鉴定方法
作者:杨扬;田红丽;易红梅;王璐;范亚明;常诗惠;王凤格;宋伟;赵久然
关键词:玉米;单交种;SSR标记;杂种优势群;杂种优势模式
-
吉林省玉米种质资源SSR和SNP分子身份证的构建及应用
作者:张茗起;王蕊;张春宵;孙擘;任洁;李淑芳;王璐;朱少喜;张江斌;施昕晨;王海杰;张云龙;田红丽;赵怡锟;匡猛;王元东;易红梅;李晓辉;王凤格
关键词:玉米;种质资源;吉林;SSR;SNP;分子身份证
-
适于玉米杂交种复杂样品纯度鉴定的SSR复合检测方案的建立
作者:施昕晨;王蕊;葛建镕;张云龙;任洁;王璐;易红梅;王凤格
关键词:玉米;杂交种;复杂样品;纯度;SSR标记;复合检测方案
-
适于多物种的通用尾巴序列设计及通用体系的建立
作者:孙擘;王蕊;霍永学;葛建镕;匡猛;王凤格
关键词:PCR;荧光电泳;通用引物;引物设计
-
基于HTP标记对玉米DH、RIL和BC群体遗传规律的比较分析
作者:张云龙;马世鹏;许理文;赵怡锟;王蕊;朱少喜;霍永学;张立平;郭瑞佳;李莉;王元东;番兴明;王凤格
关键词:玉米;DH;RIL;BC;HTP标记;遗传规律
