适用于玉米种子分子检测的DNA快速提取新方法

文献类型: 中文期刊

第一作者: 朱万豪

作者: 朱万豪;葛建镕;刘志浩;梁紫越;任星旭;赵怡锟;王凤格;闫明明

作者机构:

关键词: 玉米种子;DNA提取;分子检测;蛋白酶K

期刊名称: 分子植物育种

ISSN: 1672-416X

年卷期: 2025 年 23 卷 016 期

页码: 5365-5371

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: DNA提取是应用DNA指纹鉴定技术进行分子检测的关键步骤,常见的DNA提取方法在DNA质量、提取速度、试剂危害程度、提取成本等方面皆有不足之处,因此,发展高效、经济、便捷的提取方法十分必要。本研究以玉米种子为材料,使用含蛋白酶K的SDS提取液,利用PCR仪进行提取程序,建立了一种DNA快速提取新方法。方法为使用的提取液含100μg/mL蛋白酶K,SDS含量推荐0.3%~0.7%,提取程序为55℃25 min、95℃10 min、4℃保存。由该方法提取的DNA琼脂糖凝胶电泳谱带清晰明亮,DNA链完整度较好,DNA质量较高;使用玉米纯度及真实性SSR引物进行PCR扩增,荧光毛细管电泳检测表明,引物扩增结果良好,荧光信号强,扩增峰型和片段大小与预期相符,背景干净无杂峰,DNA提取量及质量满足纯度及真实性检测的要求。该方法操作简单,96个样品的提取时间约为30 min,所提取的DNA可以很好地应用到后期的PCR反应中。该方法具备实际检测应用价值,尤其适用玉米种子的分子检测。

分类号: S513

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