非洲猪瘟病毒EP364R蛋白在杆状病毒表达系统中的表达及鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 杨扬

作者： 杨扬;张妍;张俊杰;管志欣;李昱昊;孙卿;李宗杰;李蓓蓓;刘珂;邵东华;邱亚峰;魏建超;马志永

作者机构：

关键词： 非洲猪瘟病毒;EP364R;杆状病毒表达;免疫原性

期刊名称： 中国动物传染病学报

ISSN： 1674-6422

年卷期： 2023 年 31 卷 006 期

页码： 146-150

收录情况： 北大核心

摘要： 非洲猪瘟病毒(ASFV)EP364R蛋白是ASFV的ERCC4核酸酶结构域.为了获得具有免疫原性的EP364R蛋白,本研究将ASFVEP364R基因构建到杆状病毒表达载体上,将重组质粒转座DH10Bac感受态中,经过3次蓝白斑筛选,获得重组Bacmid-EP364R质粒,将Bacmid-EP364R质粒转染至细胞中,收获上清,在正常细胞中传三代,以获得重组杆状病毒rBac-EP364R.使用Western blot和间接免疫荧光(IFA)实验鉴定重组蛋白得到表达及其免疫原性.本研究结果显示,在感染的细胞可检测到EP364R蛋白的表达,并可被His单克隆抗体特异性识别.结果表明杆状病毒系统成功表达EP364R蛋白并具有良好的反应活性,为后续开展ASFV血清学诊断和亚单位疫苗的研究奠定基础.

分类号： S852.65

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