猪IFN-γ mRNA Taq Man荧光定量RT-PCR检测方法的建立
文献类型: 中文期刊
第一作者: 韦天超
作者: 韦天超;田志军;周艳君;安同庆;肖燕
作者机构:
关键词: 猪;IFN-γ;荧光定量RT-PCR;Taq Man荧光探针
期刊名称: 中国兽医科学
ISSN: 1673-4696
年卷期: 2009 年 39 卷 02 期
页码: 168-172
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 为建立一种检测猪γ-干扰素(IFN-γ)的荧光定量RT-PCR方法,针对猪IFN-γ基因和管家基因cyclophilin A(CyPA)的核苷酸序列分别设计了特异性引物和TaqMan荧光探针,以重组质粒pMD18-T-IFN-γ和pMD18-T-CyPA为标准品,进行实时荧光定量RT-PCR检测,并构建猪IFN-γmRNA和CyPA的荧光定量RT-PCR标准曲线。结果表明,建立的方法在1×101~1×107copies/μL模板范围内具有良好的线性关系,相关系数r2均高达0.999,扩增效率均高于99.0%;可检测至少为100 copies的阳性标准品。该方法具有快速、敏感性高、特异性强和重复性好等特点,可应用于临床样品的检测。
分类号: S852.4
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