毒害艾美耳球虫疫苗ENYS株TaqMan qPCR检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 靳浩展

作者： 靳浩展;肖文婉;廖申权;戚南山;李娟;吕敏娜;蔡海明;胡俊菁;林栩慧;宋勇乐;陈祥杰;朱易斌;尹理君;张健騑;张旭;孙铭飞

作者机构： 佛山科学技术学院;广东省农业科学院动物卫生研究所/农业农村部禽流感等家禽重大疫病防控重点实验室/广东省畜禽疫病防治研究重点实验室

关键词： 毒害艾美耳球虫;减毒活疫苗;全基因组重测序;分子标记;TaqMan qPCR

期刊名称： 广东畜牧兽医科技

ISSN： 1005-8567

年卷期： 2024 年 004 期

页码： 1-8

摘要： 为了对E. necatrix ENYS株在生产中进行质控及对临床应用效果的监测，该研究对ENYS株和ENGD株进行全基因组重测序，结合生物信息学分析建立了一种TaqMan qPCR检测技术。结果显示，En-marker5测序结果与预期相符，最优的引物浓度和探针浓度分别为500nM和250 nM，标准曲线的斜率为-3.249，相关系数为0.999，可以通过Ct值对模板浓度定量，该方法检测下线为290个拷贝/反应和50个卵囊/反应，灵敏度是传统PCR的10倍；该方法可以特异性检测EnYS株，不能扩增其他种的疫苗株和野毒株以及肠道病原菌；重复性检测的变异系数小于0.6%，重复性良好。本研究针对E. necatrix EnYS株开发了一种灵敏度高、特异性强、稳定性好的TaqMan qPCR检测方法，为E. necatrix EnYS株的安全性评估及临床应用提供技术支持。

分类号： S859.797

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