小麦内生固氮菌分离及其ACC脱氨酶测定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 秦宝军

作者： 秦宝军;罗琼;高淼;胡海燕;徐晶;周义清;孙建光

作者机构：

关键词： 小麦;内生固氮菌;ACC脱氨酶;根际促生细菌

期刊名称： 中国农业科学

ISSN： 0578-1752

年卷期： 2012 年 45 卷 06 期

页码： 1066-1073

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】了解小麦内生固氮菌数量,筛选具有ACC(1-aminocyclopropane-1-carboxylate,1-氨基环丙烷-1-羧酸)脱氨酶活性的小麦内生固氮菌,确定筛选菌株的系统发育地位与分类地位,为微生物肥料生产收集菌种资源。【方法】样品表面灭菌后采用无氮培养法筛选内生固氮菌,乙炔还原法测定菌株固氮酶活性;采用ACC唯一氮源法筛选ACC脱氨酶阳性菌,比色法定量测定ACC脱氨酶活性;PCR扩增得到菌株16S rDNA,通过序列测定和相似性分析研究菌株的系统发育;通过形态、生理生化特征和16S rDNA序列比对鉴定菌种。【结果】小麦体内固氮菌数量为(0.2—17.8)×105cfu.g-1鲜重;分离到小麦内生固氮菌60株,固氮酶活性在1—36 nmol C2H4/h.mg蛋白,其中9株具有ACC脱氨酶活性,活性在0.87—9.32μmolα-丁酮酸/h.mg蛋白;新分离菌株9136固氮酶活性为1.82 nmol C2H4/h.mg蛋白,ACC脱氨酶活性为9.32μmolα-丁酮酸/h.mg蛋白,初步鉴定为假单胞菌Pseudomonassp.。【结论】田间自然生长的小麦体内有大量固氮菌,数量在105cfu.g-1鲜重,其中部分菌株具有ACC脱氨酶活性,个别菌株具有较高的ACC脱氨酶活性,可能对作物抵御不良环境具有作用。

分类号： S512.1

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