犬细粒棘球绦虫抗原ELISA检测方法的建立
文献类型: 中文期刊
第一作者: 班万里
作者: 班万里;徐晶;刘帅;卡马力·吾力江;潘星羽;王冰洁;王延;塔力甫汗·古丽扎提;特列吾汗·穆尼拉;赵莉;张壮志
作者机构:
关键词: 细粒棘球绦虫;抗原;单克隆抗体;ELISA;样品盘
期刊名称: 畜牧与兽医
ISSN: 0529-5130
年卷期: 2024 年 56 卷 009 期
页码: 70-74
收录情况: 北大核心
摘要: 旨在建立敏感特异的犬细粒棘球绦虫(Eg)抗原ELISA检测方法。用细粒棘球绦虫表膜抗原(EgSfAg)免疫兔获得抗血清,同时利用抗EgSfAg杂交瘤细胞株4E8制备单抗,通过亲和层析获得纯化的多抗和单抗4E8,制备Eg、多房棘球绦虫、泡状带绦虫、多头绦虫和犬弓首蛔虫等5种蠕虫抗原作为特异性质控样品,利用单抗4E8进行Western blot检测,通过人工感染犬结合氢溴酸槟榔碱下泄法制备阳性对照样品,同时设置敏感性质控样品和阴性对照样品,构建样品盘,以多抗为捕捉抗体,HRP标记的单抗4E8为检测抗体,建立犬Eg抗原ELISA检测方法,并验证该方法的敏感性和特异性。结果:Western blot检测证明单抗4E8仅与EgSfAg有特异性反应;建立的ELISA检测方法最低检出量为1∶512;对130份阳性样品的平均检出率为95.38%;交叉试验结果显示仅EgSfAg结果为阳性;检测150份阴性样品的平均符合率为95.56%。综上,建立的ELISA方法具有较好敏感性和特异性,为终末宿主棘球蚴病的诊断和流行病学调查提供了一种安全、简便、高效的免疫学检测方法。
分类号: S855.99
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