小鼠B16黑色素瘤细胞酪氨酸酶基因的克隆及在毕赤酵母中的表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 樊剑鸣

作者： 樊剑鸣;张晓峰;罗俊;许君;张巧;张改平

作者机构：

关键词： 酪氨酸酶基因;黑色素瘤细胞;毕赤酵母

期刊名称： 细胞与分子免疫学杂志

ISSN： 1007-8738

年卷期： 2008 年 24 卷 08 期

页码： 828-830

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 目的:克隆酪氨酸酶基因(TYR),并在毕赤酵母中表达和纯化其融合蛋白,体外测定纯化的TYR活性。方法:利用RT-PCR技术,从小鼠B16黑色素瘤细胞中克隆全长TYR,克隆至pMD18-T载体,进行双链核苷酸序列测定。构建TYR毕赤酵母表达质粒pPICZaA-TYR并导入毕赤酵母Pichia pastoris GS115,表达的重组蛋白用SDS-PAGE和Western blot进行分析,采用Co2+离子亲和层析柱纯化TYR并采用TYR多巴速率氧化法体外测定纯化的TYR活性。结果:克隆了TYR基因。构建了重组表达质粒pPICZaA-TYR。SDS-PAGE和Western blot分析显示,在相对分子质量(Mr)为约53000处出现1条特异性蛋白带,且能与兔抗TYR抗体发生反应。结论:克隆TYR基因片段与基因库所登录的序列相一致,并在毕赤酵母中获得表达和纯化并在体外测定了纯化的TYR活性。

分类号： R739.5

  • 相关文献

[1]锦鲤酪氨酸酶基因序列分析及其在不同锦鲤品系不同组织中的表达. 王巍,胡红霞,孙向军,牛翠娟. 2012

[2]长牡蛎酪氨酸酶基因(CgTyr1)SNP多态性与壳色性状的关联. 赵博文,李琪,王九龙,于红. 2020

[3]水貂酪氨酸酶(TYR)基因克隆、SNPs筛查及其皮肤组织mRNA差异表达分析. 宋兴超,刘琳玲,潘虹军,赵家平,贾赟,杨福合,徐超. 2021

[4]水貂酪氨酸酶基因外显子1的鉴定及序列变异分析. 宋兴超,徐超,岳志刚,王雷,丛波,刘琳玲,杨福合. 2014

[5]美洲水貂TYR 基因变异与毛色相关性分析. 邢思远,杨童奥,郭强,杨福合. 2015

[6]美洲水貂TYR基因变异与毛色相关性分析. 邢思远,杨童奥,郭强,杨福合. 2014

[7]美洲水貂TYR基因变异与毛色相关性分析. 邢思远,杨童奥,郭强,杨福合. 2015

[8]长牡蛎Wnt5b基因的鉴定及在黑色素生成中的作用. 霍春草,杨文豪,蔡帅,于涛,刘晨,张海坤,韩怡静,张国光,刘雅琼,王晓通. 2024

[9]酪氨酸酶和漆酶基因在不同颜色金针菇中的表达模式. 梁欣敏,崔玉琴,雷梦婷,韩婧,贾定洪,王波,彭卫红,何晓兰,刘询. 2025

[10]抗菌肽模式肽PGYa的分子设计、克隆及在毕赤酵母中的分泌表达. 张建峰,蒋宗勇,唐兆新,王贵平,余永鹏,魏文康,李春玲. 2008

[11]大菱鲆红体病虹彩病毒主要衣壳蛋白基因在毕赤酵母中的重组分泌表达. 吴成龙,史成银,黄倢,孔晓瑜. 2009

[12]猪视黄醇结合蛋白在毕赤酵母中的表达及检测. 张冬杰,谷溪,杨国伟,刘娣. 2009

[13]米根霉脂肪酶基因pro-ROL和m-ROL在毕赤酵母中的密码子优化、表达和酶学性质的比较分析(英文). 严翔翔,黄日波,张搏. 2011

[14]重组毕赤酵母产凝乳酶发酵参数优化的研究. 郑丽,王昕,王景会,邵淑娟,李倬林. 2012

[15]重组毕赤酵母产凝乳酶发酵条件研究. 张健,张莉,李玉秋,杨贞耐. 2011

[16]毕赤酵母表达猪胃蛋白酶的研究. 刘西梅,安立国,乔宪凤,唐青海,华文君. 2008

[17]一个外切菊粉酶基因的克隆表达及酶学性质. 王成华,陆雁,王青艳,申乃坤,黄日波. 2013

[18]岭南黄鸡肌生长抑制素基因成熟肽的克隆及酵母表达质粒的构建. 周红蕾,李春玲,王贵平,侯加法. 2008

[19]猪IFNα在毕赤酵母中分泌表达条件的优化及高密度发酵. 蓝胜芝,于瑞嵩,俞明月,董世娟,曹祥荣,李震. 2006

[20]酿酒酵母脂肪酶基因TGL3的克隆及其在毕赤酵母中的高效表达. 卢福芝,曾丽娟,朱绮霞,张搏,韦宇拓,黄日波. 2010

作者其他论文 更多>>

微信小程序