槟榔黄化植原体TaqMan探针实时荧光定量PCR检测方法的建立

文献类型: 中文期刊

第一作者: 林兆威

作者: 林兆威;孟秀利;唐庆华;牛晓庆;宋薇薇

作者机构:

关键词: 槟榔;槟榔黄化病;植原体;TaqMan实时荧光定量PCR;病害检测

期刊名称: 热带作物学报

ISSN: 1000-2561

年卷期: 2024 年 006 期

页码: 1120-1126

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 槟榔是海南省重要的热带经济作物,由植原体侵染引起的槟榔黄化病(areca palm yellow leaf disease, YLD)是当前我国槟榔生产上的一种毁灭性病害。为了建立精准高效的槟榔黄化植原体检测方法,本研究基于槟榔黄化植原体16SrDNA基因,设计并合成特异性引物AMf/AMr和探针AM-Prode,使用该方法进行准确性、敏感性、特异性及重复性测试,并在其他植物的植原体病害进行检测。结果显示:本检测方法能够准确的检测出阳性样品,健康样品无扩增曲线;在敏感性测试中,该检测方法能检测到1.16×10~1 copies/μL样本浓度水平,其标准曲线方程为y=–3.4185x+43.624,扩增效率为96.12%,相关系数R2=0.9833;在特异性测试中,该检测方法对YLD的检测具有较好的特异性,槟榔、槟榔其他病害病原及其内生菌的基因组对本方法未造成干扰;在重复性测试中,该检测方法对槟榔黄化病的检测具有较好的重复性;并且该检测方法可对苦楝黄化病、细圆藤丛枝病及辣椒黄化病等8种植原体病害进行检测,对植原体的检测具有一定的通用性。本检测方法的建立,有利于为槟榔黄化病的精准诊断、病原监测及媒介昆虫的检测等研究提供可靠的技术手段。

分类号: S763.7

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