文献类型: 中文期刊
第一作者: 王晓杜
作者: 王晓杜;陈培君;沈阳;邱亚峰;邓绪芳;史子学;彭丽娜;罗金燕;刘超;马志永
作者机构:
关键词: H3N2;猪流感病毒;M2蛋白;多克隆抗体
期刊名称: 生物工程学报
ISSN: 1000-3061
年卷期: 2010 年 26 卷 01 期
页码: 16-21
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 流感病毒的M2蛋白在流感病毒复制中起着重要作用,是抗流感病毒的靶标分子。本研究以提取的病毒基因组RNA作为模板,RT-PCR扩增H3N2亚型猪流感病毒M2基因,分别构建了重组原核表达载体和重组真核表达载体,建立了M2蛋白的原核和真核表达系统。通过大肠杆菌表达系统,制备了M2重组蛋白,并免疫大鼠制备了多克隆抗体。Western blotting和间接免疫荧光方法检测表明所制备的抗体能识别真核表达的M2蛋白和病毒感染细胞后表达M2蛋白,具有良好的特异性。重组M2真核表达载体转染Vero细胞,表达的重组M2蛋白大小为20kDa,定位于细胞浆中,与病毒感染细胞中的M2蛋白定位相同。Western blotting检测表明M2蛋白在病毒感染细胞12h后才能检出,晚于NS1、NP和M1,属于病毒复制的晚期蛋白,可作为病毒复制晚期的指示分子。本研究为弄清M2蛋白在病毒复制过程中的生物学功能奠定了基础。
分类号: S852.65
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