H5N1亚型高致病性禽流感病毒NP基因在昆虫细胞中的表达及其表达产物的生物学活性

文献类型： 中文期刊

第一作者： 万春和

作者： 万春和;刘明;刘春国;杨涛;刘大飞;齐金龙;陈浩;杜金铃;李洪涛

作者机构：

关键词： 禽流感病毒;核蛋白基因;昆虫细胞杆状病毒表达

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2008 年 05 期

页码： 380-385

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 根据GenBank上登录的H5N1亚型高致病性禽流感病毒(HPAIV)核蛋白(NP)基因序列设计引物,通过PCR扩增出A/Goose/HLJ/QFY/04(H5N1)毒株的NP基因片段,将其克隆到pFastBacGP67B杆状病毒载体上,将筛选的阳性重组转座载体pFastBacGP67B-NP转化至含有杆状病毒穿梭载体的DH10Bac感受态细胞,经蓝白斑筛选和PCR鉴定,构建了杆状病毒表达载体,获得了重组转座子(rBacmid-NP),在脂质体介导下转染对数生长期的Sf9昆虫细胞,获得重组杆状病毒(rBv-NP)。SDS-PAGE分析、Western-blotting检测、免疫组化分析和ELISA试验结果表明,分子质量约为54 ku的重组核蛋白得到了高效表达,该表达蛋白具有良好的生物学活性。

分类号： S852.5

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