hAPOB的克隆、原核表达及抗体效价分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 徐志伟

作者： 徐志伟;王期;徐一然;陈永霞;徐小波;于建宁

作者机构：

关键词： hAPOB;pGEX-4T-1;抗血清;抗体效价;湖羊

期刊名称： 西南农业学报

ISSN： 1001-4829

年卷期： 2019 年 02 期

页码： 446-450

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】人载脂蛋白B(hAPOB)是保持人体血脂恒定的重要蛋白,检测hAPOB具有重要的临床价值。【方法】本研究将hAPOB(97-526AA)序列连接到原核表达载体pGEX-4T-1中,构建pGEX-4T-1-hAPOB(97-526AA)原核表达质粒,然后将其转入宿主菌BL21,宿主菌表达出与预期分子量大小相符的80 kDa的融合蛋白;将纯化后的融合蛋白免疫湖羊,制备抗hAPOB血清并检测抗体效价。【结果】每次注射0.4 mg的原核表达抗原,湖羊抗血清的产生效果最佳;经间接酶联免疫分析(ID-ELISA)方法检测,原核表达蛋白免疫湖羊得到的hAPOB抗体效价为l︰40000。【结论】本试验获的抗血清能够满足商用标准,为后续拓展其应用奠定了基础。

分类号： S852.4

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