半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)CSFR2基因的重组表达及其蛋白纯化与功能分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 王凯琳

作者： 王凯琳;胡乔木;陈松林

作者机构：

关键词： 半滑舌鳎;性别相关基因;CSFR2;重组蛋白;生物活性

期刊名称： 渔业科学进展

ISSN： 2095-9869

年卷期： 2015 年 36 卷 02 期

页码： 30-36

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 通过对半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)进行全基因组及转录组测序,预测了一个半滑舌鳎性别相关基因CSFR2,目前已对该基因进行了克隆和表达分析。为进一步研究CSFR2基因的功能,本研究从蛋白层面入手,构建了原核表达载体p ET-32a-CSFR2,转化到大肠杆菌E.coli进行诱导表达,用His Trap进行蛋白纯化,SDS-PAGE电泳检测诱导及纯化产物,并将表达纯化的CSFR2蛋白注射1龄半滑舌鳎精巢。由于CSFR2是一个性别相关基因,因此无法通过免疫反应来直接检测其蛋白活性,本研究通过不同时间点取样检测半滑舌鳎其他性别相关基因Cyp19a和Foxl2的表达量变化,来间接反应CSFR2蛋白的活性及功能。实验结果显示,重组蛋白能够进入到活体细胞内并发挥一定作用,在6–72 h内对性别相关基因Cyp19a和Foxl2的表达有上调作用,说明CSFR2蛋白具有生物活性,并能调节其他性别相关基因的表达量,间接促进雄激素转化为雌激素。本研究进一步了解CSFR2基因在半滑舌鳎性别决定与分化中的作用,可为半滑舌鳎性别控制提供理论依据,在人工诱导鱼类性逆转方面有重要应用价值。此外,本研究为蛋白活性验证提供了一种新方法。

分类号： S917.4

  • 相关文献

[1]半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)雌性特异基因CSW3重组蛋白的表达与应用. 王天姿,王娜,胡乔木,邵长伟,陈松林. 2015

[2]半滑舌鳎WT1a基因的克隆与性别分化期的表达分析. 张红,陈松林,刘洋,温海深,朱颖,ZHU Ying. 2014

[3]半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis Günther)IGF-Ⅱ的体外重组表达. 徐永江,柳学周,张凯,武宁宁,刘芝亮,李春广. 2015

[4]半滑舌鳎类胰岛素生长因子-Ⅰ的原核表达及活性分析. 刘芝亮,徐永江,柳学周,史宝,王妍妍. 2013

[5]半滑舌鳎食欲素B的体外重组制备与生物活性分析. 徐永江,李斌,柳学周,张凯,史宝,王滨,宋雪松. 2017

[6]半滑舌鳎两种leptin基因的体外重组表达和生物活性分析. 张雅星,王滨,柳学周,徐永江,史宝,姜燕,崔爱君,张正荣,孙冉冉. 2019

[7]半滑舌鳎黑色素聚集激素重组制备与生物活性分析. 朱学武,徐永江,柳学周,史宝,王滨,李斌. 2016

[8]半滑舌鳎食欲素A体外重组表达及活性分析. 李斌,徐永江,柳学周,史宝,王滨,朱学武. 2016

[9]鲟科鱼类性别鉴别技术的研究进展及其应用. 赵峰,章龙珍,庄平,刘鉴毅,张涛. 2009

[10]精子性染色体相关基因转录本及检测方法. 王永贵,朱化彬,柳强,王栋,张林波,郝海生,杜卫华. 2008

[11]猪圆环病毒2型抗体检测间接ELISA方法的建立. 丛丽媛,蒋智勇,张春红,陈德坤,宋长绪. 2008

[12]小麦胚乳14-3-3基因的克隆及其重组蛋白的原核表达. 戴双,李豪圣,程敦公,刘爱峰,曹新有,刘建军,宋健民. 2012

[13]猪CD40L基因的原核表达及特异性多克隆抗体制备. 薛刚,祝长青,郑其升,张雪花,李倬,侯继波. 2011

[14]鸽β-防御素1基因的克隆及其生物学作用鉴定. 李妍妍,徐杨,张婷婷,徐倩倩,韩宗玺,刘胜旺,马得莹. 2014

[15]亲和标签在重组蛋白表达与纯化中的应用. 陈爱春,彭伟,汪生鹏. 2012

[16]泰勒焦虫重组蛋白TaSP-Tams1-SPAG1间接ELISA检测方法的建立. 魏玉荣,易忠,马文戈,郭会玲,向银珍,米晓云,陈智,魏婕,苗书魁,吴国梁,祁巧芬,埃尼瓦尔·太外库力,黄炯. 2013

[17]基于密码子优化策略的牛妊娠相关糖蛋白9(bPAG9)的原核表达及纯化. 卢春霞,刘长彬,石国庆,杨华. 2020

[18]谷氧还蛋白(AbGrx-1)对水稻干尖线虫在氧化胁迫下的保护作用. 冯辉,范亚磊,张金凤,朱红利,魏利辉. 2019

[19]布氏锥虫C型凝集素类似蛋白的鉴定. 张晶,石星明,齐仲强,刘益民,贾洪林,杉本千寻. 2013

[20]牛妊娠相关糖蛋白16(bPAG16)基因密码子优化及表达. 刘长彬,卢春霞,卢守亮,倪建宏. 2021

作者其他论文 更多>>

微信小程序