利用RNAi介导的抗病性获得抗2种花生病毒的转基因烟草

文献类型: 中文期刊

第一作者: 晏立英

作者: 晏立英;许泽永;廖伯寿

作者机构:

关键词: 转基因烟草;花生条纹病毒;花生矮化病毒;花生黄瓜花叶病毒;抗性

期刊名称: 植物病理学报

ISSN: 0412-0914

年卷期: 2012 年 42 卷 01 期

页码: 37-44

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 分别以花生条纹病毒红安株系(PStV-Hongan)外壳蛋白基因(CP),花生矮化病毒轻型株系(PSV-Mi)和花生黄瓜花叶病毒(CMV-CA)复制酶基因2a为模板,通过PCR方法分别得到PStV-CP 5'端,PSV-Mi和CMV-CA2a 3'端150 bp的片段,3种片段混合物为模板经PCR拼接得到450 bp的片段,此拼接片段通过Gateway系统重组至植物表达载体pK7GW1WG2,得到含反向重复拼接片段的植物表达载体pK450。冻融法导入根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)菌株GV3101后,叶盘法转化本生烟(Nicotiana benthamiana),经PCR检测,获得转基因植株。对T1代转基因植株分别人工接种3种病毒,66.7%的植株表现对PStV免疫,9%的植株表现对CMV-CA的恢复抗性,全部植株对PSV感病。siRNA的Northern blot结果表明,所有转基因烟草植株都含有病毒特异siRNA,siRNA含量随接种后时间延长而衰减。

分类号: S572

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