FMDV3C蛋白酶基因的克隆及在昆虫细胞中的表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 曹轶梅

作者： 曹轶梅;卢曾军;孙普;孙甲川;刘在新

作者机构：

关键词： FMDV;3C蛋白酶基因;Sf9细胞;杆状病毒;表达

期刊名称： 微生物学报

ISSN：

年卷期： 2008 年 03 期

页码： 312-316

收录情况： CSCD

摘要： 口蹄疫病毒3C蛋白酶在病毒的致病机理、聚蛋白前体的加工和RNA的复制上起着很重要的作用,是当前抗病毒研究的一个重要靶点。本研究从AsiaⅠ型FMDV适应细胞毒中提取RNA,用RT-PCR技术扩增3C基因,首先克隆到pGEM-T载体,再亚克隆到杆状病毒转移载体pMelBacB中,构建出重组转移载体pMel-3C。最后将含有目的基因的转移载体与线性化的杆状病毒DNA共转染Sf9细胞,通过噬斑筛选和PCR鉴定,获得了重组杆状病毒。重组病毒经扩增后以10个MOI感染Sf9细胞,接种病毒72h后收获细胞,样品经SDS-PAGE和Westernblot证实3C蛋白获得表达,分子量约23kDa,与预测蛋白大...

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