阴沟肠杆菌过氧化氢酶基因的重组表达及酶学性质研究

文献类型: 中文期刊

第一作者: 周利伟

作者: 周利伟;张艳丽;左冬阳;张伟;张宇宏

作者机构:

关键词: 过氧化氢酶;阴沟肠杆菌;毕赤酵母;基因表达;葡萄糖氧化酶

期刊名称: 生物技术进展

ISSN: 2095-2341

年卷期: 2013 年 003 期

页码: 211-217

摘要: 过氧化氢酶又称触酶,在食品、纺织和造纸等领域应用广泛。本研究从阴沟肠杆菌 Enterobacter cloacae XTL13中克隆得到一个过氧化氢酶基因 cat1,该基因全长2250 bp,编码749个氨基酸和一个终止密码子。将 cat1基因连接pPIC9载体并转化毕赤酵母 GS115,得到高效表达 CAT1的重组酵母菌株。在摇床水平过氧化氢酶活性可达300 U/ mL。重组 CAT1最适温度为37℃,最适 pH 为6.5,比活力为1667 U/ mg;50℃处理2 h 或 pH 5~8处理1 h 后,仍然能保留80%以上的酶活力。当 CAT1与葡萄糖氧化酶(GOD)联合使用(酶活力比例为1∶30)时,能够解除过氧化氢对 GOD 活力的抑制,使得 GOD 能够更好地发挥其作用。另外,本研究还建立了一种快速筛选过氧化氢酶重组菌株的方法。

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